老大好久没出现了啊，转个丁香园的帖子。关于胶体金的不同缓冲系统假阳性的问题。

numbrg · 发表于 2013-8-16 10:49

登陆有奖并可浏览互动！

您需要登录才可以下载或查看，没有账号？立即注册

×

cc530
求助：实验做细菌胶体金试纸条，阴性对照为PBS时有假阳性出现，把PBS换成TBS后假阳性消失，帮忙分析一下为什么会这样。。（PBS7.4,0.01M，TBS7.4,0.05M），急求~~~

numbrg
这个问题遇到过，估计你的体系太疏水，测PBS假阳应该是伴随着金样分离的现象吧，而TBS没有分离也就没有假阳，你在PBS中加表活也能消除此种假阳。
Tris是制备表活的原料，应该是具有表活的性质，所以Tris缓冲液就相当于PBST了，这是我的猜测，不知道对不对，有没有人来解答一下？

ashafriend
这个太正常了……五花八门各种，如果只是做对照用的话，就换个别的缓冲体系算了，我还遇到过加了PBS后死金的，更郁闷。
关键你的试纸条是啥系统的，尽量别交叉，交叉后假阳、假阴、增强都有可能发生。

cc530
我的金标抗体体系是tris-hcl7.4的体系，那意味着我整个体系，不管是样品垫还是金抗保存液都用统一的Tris-HCL的体系吗？谢谢了。

cc530
用PBST或者TBST都只是阴性对照，那照这样的话，我是不是应该在我实验的试纸条体系里都增加表面活性剂呢？增加的话，我应该在样品垫处理液里加还是金标抗体重悬液里加？哦，还有，X-triton100是不是要比吐温20效果好些呢？谢谢了。

booze
X-triton100重复性不好

cc530
今天根据您的指点，做了两次，吐温20从0.5%、1%、2%、3%、5%，点样滴加7.4的PBS的T线假阳性颜色强于7.4的PB>强于7.4的PBST>强于7.4的TB>强于8.8的TB>强于6.8的TB；基本上8.8和6.8的TB在吐温20浓度≤2%时为阴性，但随吐温浓度增大时，整个体系的假阳性呈增强趋势，急求帮忙分析一下，谢谢各位了前辈了。

numbrg
吐温用不了那么高，1%以内就可以了，高了有可能造成金和蛋白的解离，造成裸金，就会出假阳。