浅谈凝血四项检测影响因素

检验医师

凝血四项检测包括：凝血酶原时间（PT）、纤维蛋白原（FIB）、活化部分凝血活酶时间（APTT）和凝血酶时间（TT）。凝血酶原时间主要是检测外源性凝血因子是否有无缺陷；纤维蛋白原（FIB）检测血栓形成过程中纤溶系统是否亢进；活化部分凝血活酶时间检测内源凝血因子是否正常；凝血酶时间是反映纤维蛋白原转变成纤维蛋白过程是否存在异常抗凝现象。凝血四项是出血和血栓性疾病的常规检测项目，也是内源性、外源性凝血因子缺乏或减少的过筛试验，对止血和血栓性疾病的诊断、以及为手术前了解患者止血功能提供重要依据。但是，在实际检测过程中由于采血程序、标本制备过程、仪器试剂因素以及操作人员的技术水平和工作态度等原因的影响经常发现凝血四项检测到的数据与患者实际情况发生偏差，不能客观的反应实际情况，对检测结果造成一定的影响。针对以上这些因素进行研究探讨，提高凝血四项检测的准确性有重要意义。

1 标本采集及制备

凝血四项检测时标本的采集对结果影响比较大。采血时患者应处于平静、放松、空腹状态，不能在剧烈运动后采血，因为激烈运动后Ⅶ因子活性会快速上升，影响APTT检测结果。吸烟会使血小板凝聚性明显升高，某些药物对凝血机制的功能有影响，青毒素会使PT、APTT明显延长，在进行采血前医务人员应该向患者告知这些知识，采取适当的措施避免这些因素的影响。采血时止血带不能扎太紧、时间太长，否则会使局部血液浓缩，内皮细胞释放活性物质，导至凝血和纤溶系统被激活。采血针头不能太细，要一针见血，以防穿刺损伤组织使组织液混入样本，促使凝血酶形成，加速血液凝固，影响结果，避免同一部位反复穿刺，如穿刺不顺利应更换至另一侧采血。采血后立即将血液与抗凝剂混匀，避免剧烈震摇以防溶血。标本采集尽快送检，如不能及时送检，标本应保存于（2-8℃）冰箱中。

2 仪器设备及安装

不同型号和不同生产厂家生产的仪器精度和数据稳定性有一定的差别，在购买仪器前应该对生产厂家及仪器类型进行评估，仪器供应商要有生产资质和雄厚的技术力量，选择知名度比较高的仪器型号。我单位新购进一台日本Sysmex公司生产的CA-1500型全自动血凝仪经试用验证各个性能都比较好，检测数据精确度比较高。仪器应该安装在避免阳光直射、通风良好、远离震源和热源、水平度良好的平台上,控制室内相对湿度范围30%～85%,温度在15～30℃,用稳定性良好的两相电压（220V）作为仪器的电源。不能把其它无线电及通讯设备放在离仪器太近的地方，以免仪器受高频波或无线电干扰，使检测数据产生误差。制定相关的维护和保养制度，定期进行自校正或者经有关部门如计量所进行定期校正，对已损坏的部件应及时更换。

3 试剂因素

抗凝试剂。抗凝剂的选择及用量应该进行严格控制，最好采用0.109mol/L构橼酸钠，血与抗凝剂以1：9的比例混合，配比的时候要求准确，否则会影响检测结果。如果血液中血球比积＜25%或者＞55%的时候需要对抗凝剂和血的比例调整，其方法为抗凝剂毫升数=0.00185×血液毫升数×（100-压积）。不能使用变质的构橼酸钠溶液，否则会使PT、APTT检测结果缩短。在未经验证情况下不得随便自制其它抗凝剂来代替，应该采用含有抗凝剂的成品试管。抗凝剂的种类比较多，比如EDTA-Na2、草酸钠抗凝剂等，但是使用这些抗凝剂对检测结果均有影响[3]。EDTA-Na2能抑制或干扰纤维蛋白的形成，草酸钠能与血液里的Ca2+形成不溶性沉淀物影响检测结果。

检测试剂。凝血四项检测的试剂对温度稳定性比较敏感，在保存、使用、和运输过程中应该严格按照相关技术说明书的条件要求操作，否则会引起试剂变质对检测结果造成误差。我们单位CA-1500型凝血仪使用的检测试剂供应商是美国DADE BEHRING公司，未开封的试剂于2—8℃保存。APTT试剂为液体使用前不需要复溶，开盖后在2—8℃下可以保存5天。PT、TT、FIB试剂使用前按规定量添加蒸馏水后放在37℃的水浴中复溶15—20分钟，复溶后除FIB试剂仅能在2—8℃下保存3天，另外两项试剂可以保存5天。复溶后的试剂随放置时间越长对检测结果的影响越大，使用的时候应该按照预期用量复溶适量的试剂，避免复溶过多用不完而保存太长的时间。检测试剂及抗凝试剂都不得使用过期的试剂来检测。标本从血液采集后应在4h内完成四项检测，如果放置时间过长会影响检测结果。检测出来的数据可以根据下表判断患者凝血四项是否正常。

表1  凝血四项检测参考值

4 检测人员操作因素

在检测过程中，人为是造成凝血四项检测不准确的一项重要因素。在检测8149例中,由于人为因素造成结果误差一至两项不准确的约占26%[4]。作为医学检验科内工作的检验人员，必须经过培训取得相关资格证后持证上岗，必须以严肃认真的态度对待检验工作，细心负责。严格执行工作职责，遵守检验操作规范，按照仪器使用说明书要求操作各种检验仪器设备。对于刚取得上岗资格证的新员工不得单独从事检验及样本采集工作，必须由老员工带一段时间，经考核合格后方可单独从事医学检验工作。

结束语

凝血四项用于出血性疾病和血栓性疾病的诊断、手术前了解患者止血功能的重要手段。但是血液离开身体后比较敏感、采血程序、抗凝剂、检测试剂、操作人员以及仪器设备等因素均会对检测结果产生影响。通过对这些因素的控制，对提高凝血四项检测数据的准确性有重要意义。

作者：桂林市灵川县中医医院检验科  秦初英