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科研新利器 | 抗体定点修饰叠氮基团试剂盒,开启生物标记新征程!

2025-3-11 14:37| 编辑: 归去来兮| 查看: 173| 评论: 0|来源: 小桔灯网-净姐

摘要: 助力科研一路腾飞!

在生物科研的广袤天地里,精准的实验工具是探索生命奥秘的关键钥匙。今天,要给大家介绍一款神器 —— 乐为生医的抗体定点修饰叠氮基团试剂盒,它就像科研道路上的 “魔法盒”,为生物标记实验带来了新的曙光。它不仅拥有前沿的技术和卓越的性能,还带着超给力的优惠活动,助力科研一路腾飞!


01

产品亮点,惊艳亮相

这款试剂盒的技术堪称一绝,它运用创新的一步法,能将叠氮基团精准无误地连接到IgG抗体的重链上,就像给抗体装上了精准导航,且完全不影响抗体的可变区,也就是抗原结合区域,确保抗体的 “识别战斗力” 丝毫不减。操作更是简单到超乎想象,短短2小时,就能完成复杂的抗体定点叠氮化修饰,让科研效率直线飙升,大大节省了科研人员的时间和精力。

图1:产品优势


经过叠氮化物修饰的抗体,更是 “本领高强”,它可以与二苯并环辛炔(DBCO)修饰的蛋白、荧光素、生物素、寡核苷酸等发生无需铜离子催化的叠氮 - 炔环加成(SPAAC)反应。这种独特的反应特性,为科研人员在生物标记、蛋白相互作用研究等多个领域提供了强大的技术支持,让科研探索更加深入、高效。


02

产品组分,一目了然

试剂盒的不同规格能满足多样化的实验需求,不管是小型的探索性实验,还是大规模的研究项目,都能找到最适配的 “科研搭档”。

需要注意的是,在开启实验前,一定要先短暂离心试管,让试剂乖乖 “归位” 到管底,这样才能保证实验顺利进行。


03

操作流程,简单易懂

图2:操作流程图


1.抗体准备:抗体类型得是IgG亚类,而且浓度要小于1mg/ml。先用buffer A进行抗体缓冲液置换,这一步可以借助超滤管超滤3 - 5次来完成。之后收集抗体并进行定量,让抗体浓度不低于1mg/ml,就像给抗体 “补充能量”,为后续实验做准备。

2.修饰反应:取100ug抗体,把体积控制在50 - 100ul内,直接加入Catalytic Enzyme管中,再加入 2.5ul Azide substrate,然后轻轻涡旋混匀,短暂离心后,将它放在37℃的环境中孵育30分钟到1小时,中间记得混匀两次,让 “小伙伴们” 充分反应。

3.脱盐处理:用Buffer B对脱盐柱进行预处理,再通过脱盐柱去除多余的Azide substrate,把抗体洗脱到buffer B中。最后将收集到的抗体转移到EP管里,震荡混匀,放在4℃保存备用。


04

实验示例,效果惊人

为了让大家更直观地感受这款试剂盒的强大功能,我们来看一个抗体定点荧光标记的实验示例。

1.抗体定点叠氮修饰:以Goat anti Mouse IgG(10mg/ml,PBS缓冲液)为例,取200ug该抗体,用buffer A进行缓冲液置换,选择滤膜孔径为50kDa的超滤管超滤3次。取100ug定量后的抗体加入Catalytic Enzyme,再加入2.5ul Azide substrate,按前面的步骤操作,最后通过脱盐柱纯化并定量。

2.标记荧光素:将制备好的抗体与DBCO - Cy5染料按照1:10的摩尔比混匀,室温孵育2小时,或者4℃过夜。孵育结束后进行脱盐处理,去除多余染料,就能得到定点修饰Cy5染料的Goat anti Mouse IgG荧光二抗啦。

3.效果鉴定:用制备好的抗体进行细胞膜蛋白染色,把抗体浓度控制在0.5 - 1mg/ml,然后进100倍稀释。以mouse来源抗体为一抗,实验结果令人惊喜!

图3:实验示例结果图


图3-1为阴性对照,不加一抗,标记Goat anti Mouse IgG-Cy5;

图3-2为加mouse来源一抗,标记Goat anti Mouse IgG-Cy5。


以上结果分析:

➣ Goat anti Mouse IgG二抗可定点修饰叠氮基团,并与DBCO-Cy5标记的荧光染料结合。

经过定点修饰叠氮基团及DBCO-Cy5标记后的Goat anti Mouse IgG-Cy5二抗可特异性识别mouse来源一抗,并与阴性对照有明显差异。


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杭州乐为生医科技有限公司的抗体定点修饰叠氮基团试剂盒,凭借其独特的技术优势、简单的操作流程和出色的实验效果,已经成为众多科研人员的得力助手。如果你也在为抗体标记实验而烦恼,不妨试试这款试剂盒,说不定会给你带来意想不到的收获!让我们一起借助这款神器,在科研的道路上勇往直前,探索更多生命的奥秘!


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