借问酒家何处有，牧童遥指IVD村。 抗原抗体作为核心原料，俗话说巧妇难为无米之炊，现在衍生出来的各种检测方法ELISA、层析、组化、化学发光等等平台，都是围绕抗原抗体展开的。 前面和大家分享了关于层析的一些相关问题，但是一直没有说核心原料-抗原抗体，因为抗原抗体涉及的面太广了，一时不知道从什么角度开始说，不知道各位小伙伴对于抗原抗体的认识在哪个阶段呢？ 先简单介绍一些基本概念以及自己浅显理解的认知，像MHC机制相关的，估计大家也不想看，比较复杂，也许等后面说到免疫原设计的时候会介绍到吧。 
抗原 抗原（antigen,Ag) 为任何可诱发免疫反应的物质。外来分子可经过B细胞上兔疫球蛋白的辨识或经抗原呈现细胞的处理，并与主要组织相容性复合体结合成复合物、再活化T细胞，引发连续的免疫反应。 在我们日常制备抗体的实验中，目前我见过的是两种，完全抗原与不完全抗原，说直白点就是一种可以直接进行免疫动物的（一般是一些大的蛋白多肽），另外一种需要与载体蛋白进行偶联后进行免疫，因为部分短肽或者化学结构小分子（相对分子质量小于10kd）不具备免疫原性和免疫反应性。
抗原表位是抗原与TCR/BCR或抗体特异性结合的最小结构和功能单位，是抗原分子中决定免疫应答特异性的特殊化学基团。T细胞及B细胞通过其表面的TCR/BCR识别抗原，这种识别具有高度的特异性：同时，被抗原活化的T细胞及B细胞分化为浆细胞而产生的效应产物抗体与抗原的结合也具有高度的特异性，上述两种特异性的子基础取决于抗原分子所含的抗原表位，故抗原表位又称抗原决定簇，其种类、位解数目及空间构型决定了抗原在免疫应答和免疫反应中的特异性。能和抗体分子结合的抗原表位的总数称抗原结合价。
每种抗体只识别一个表位而非整个抗原。即使是最简单的微生物都带有许多不同的抗原它们可以是蛋白质、脂类或糖类。 在蛋白质抗原中，由于其结构的相对复杂性，常含有多种不同的抗原表位。根据抗原表位中氨基酸的空间结构特点，可将其分为顺序表位（sequential epitope）和构象表位（conformational epitope）。由连续性排列的氨基酸残基组成的短肽所构成的抗原表位为顺序表位，又称线性表位。而由在序列上不连续排列，但在空间上彼此接近形成的特定构象的若干氨基酸组成的抗原表位称为构象表位。 所以一般我们制备抗体时，线性表位相对容易一些，具有空间构象的一般难度会大一些，因为表达出来的重组抗原的不一定形成想要的空间构象。 根据T细胞及B细胞所识别的抗原表位不同，又可将抗原表位分为T细胞表位和B细胞表位。T细胞表位是指T细胞仅识别由抗原递呈细（APC）加工后与主要组织相容性复合体（MHC）分子结合为复合物并表达于APC 表面的线性表位。T细胞表位又分为两种：①CD8+T细胞识别的表位，含8~12个氨基酸，其中第2、9位氨基酸为锚定氨基酸（anchor residue)；②CD4+T细胞识别的表位，含13~17个氨基酸。无需由APC加工和提呈即可直接激活B细胞，并由BCR或B细胞所分泌的特异抗体所识别的抗原表位称B细胞表位，该表位氨基酸长度变化较大，含5~15个氨基酸，大多为抗原分子表面的构象表位，少数为线性表位。
近年来，国内外针对环境和食品样品中的农药、兽药、环境激素、毒素及违禁食品添加剂等小分子化合物残留量的免疫分析方法的应用逐渐增多。建立小分子化合物的免疫分析方法的关键是能够制备出对小分子化合物具有高亲和力和高选择性的抗体。由于大多数农药、兽药等为小分子化合物（分子量小于10kD），不具有免疫原性，即缺乏T细胞表位而无法直接诱导动物机体等产生特异性抗体，这些小分子化合物为半抗原。针对一些不带有氨基或羧基的半抗原，须通过适当的化学方法加以适当的修饰，可以在其分子结构的某个位置上，带上端基为活性基团的连接臂，使其转变为带有游离氨基或游离羧基的衍生物，从而与大分子载体连接，生成半抗原一载体的偶联物，此偶联物即为人工抗原。它可以借助T细胞表位来间接诱导B细胞的增殖及分化，产生特异性抗体。 小分子由于分子量小，不存在不同的表位，所以制备的抗体，基本都是用竞争法检测，当然现在也有衍生出来的小分子夹心法（南京欧凯生物）有相关的产品，感兴趣的可以去了解了解。 常用的蛋白载体，故又称载体蛋白，如牛血清白蛋白（BSA）、卵清蛋白（0VA）等。载体蛋白除应具有较好的免疫原性外，还应具有足够的能反应的侧链活性基团，以便与抗原连接。相比于OVA每个分子上平均含有20个氨基基团，钥孔血蓝蛋白（KLH）每个分子上平均含有6.9个氨基基团，一个BSA分子上平均含有多达59个氨基基团。 |
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