在体外诊断试剂的技术研发中,有三大核心要素:研发理念、工艺流程以及关键原材料。 当下,诊断技术飞速发展,日趋成熟,因此在现有诊断技术框架下,思路和工艺的变革受到限制,因此提高质量的关键在于获得高品质的原材料。关键原材料则是决定诊断试剂灵敏度和特异性的基础,直接决定试剂质量的下限。 在免疫诊断中的核心原料主要是抗原和抗体,其中抗原原料可以用于制备校准品、质控品、标准品,也可以作为制备抗体诊断原料的免疫原。 抗原是指能够刺激免疫系统发生免疫应答,产生抗体,并能够与抗体特异性结合,发生免疫反应的物质。 ■ 抗原特性 抗原有两个基本特性——免疫原性和免疫反应性: ▸免疫原性:指抗原分子能够刺激机体产生免疫应答(产生特异性抗体及免疫效应细胞)的性质。 ▸免疫反应性:指抗原分子与免疫应答产物(抗体或免疫效应细胞)发生特异性结合的性质。 抗原刺激B淋巴细胞分泌特异性抗体,同时也和该抗体结合。在诊断中,前一个过程发生在体内,后一个过程发生在体外。这两个过程要求抗原提供相同或高度相似的抗原表位。体外诊断试剂的灵敏度与特异性,均与此息息相关。 ■ 抗原表位 抗原分子表面能与抗体特异性结合的部位称为表位或抗原决定簇。一般抗原分子越大,表位的数目越多。蛋白质的氨基酸排列顺序和翻译后修饰可以产生丰富的抗原表位。 一般抗原表位是由6-12 氨基酸或碳水基团组成,基于抗原表位的结构和与抗体结合部位的相互作用,主要分为: ▸ 构象表位:由抗原氨基酸序列的不连续部分组成,即这些表位是基于抗原的三维结构的表面特征和形状或三级结构与抗体结合部位相互作用。 ▸ 线性表位:由抗原的连续氨基酸组成,是基于一级结构与抗体相互作用。 来源于:https://doi.org/10.1155/2017/2680160 抗原表位相似或相同就是“密码”,抗原和抗体通过这些“密码”对号入座,特异性结合。一边可以诱导机体免疫应答产生抗体,另一边可以参与体外免疫反应与抗体特异性结合。 基于特异性反应,正确的抗原表位是抗体检测的必备条件。 此外,相对于线性表位,构象表位作为优势表位,持续刺激机体的时间更长,是体外诊断中的重点关注对象。 ■ 抗原种类 根据制备方法可将抗原分为: ▸ 天然抗原 (native):从病原体(如病毒、细菌、真菌、原虫等)中直接提取或分离得到的抗原。这些抗原存在于自然环境中,是病原体自身的结构或分子。天然抗原的制备通常涉及从病原体中纯化、提取或表达抗原蛋白质,然后经过多步骤的处理和纯化过程。 ▸ 重组抗原(recombinant):通过基因工程技术在体外合成的抗原。它是由人工合成的基因编码的特定抗原蛋白质或分子,通常使用表达系统如细菌、酵母或哺乳动物细胞来产生。重组抗原的制备是通过将目标抗原基因导入表达系统中,并使其在宿主细胞内产生目标蛋白质。然后通过细胞提取和纯化来获取重组抗原。 天然抗原和重组抗原比较 在体外诊断中,天然抗原和重组抗原之间的选择应取决于具体的应用需求。 如果开发免疫诊断测试,则天然抗原更合适。这是因为天然抗原与临床样本中的相同抗原具有相似的特性,可以提供丰富且正确的抗原表位,与抗体适配性高,在抗体检测中可以保证灵敏度和特异性。 当然天然抗原在免疫检测使用中也有一些挑战,例如对抗原冻融处理、稳定性、包被处理等,在刚刚于苏州举办的免疫诊断产品创新开发及上游方案专题研讨会上,北京迈迪安生物科技的免疫产品经理罗紫臣博士分享了分享专题讲座【天然抗原在免疫诊断检测中的应用及常见问题】,获得了热烈的参与。为了与更多行业内同仁交流,我们将于9月27日举行线上直播,届时还将邀请迈迪安免疫产品经理现场互动答疑。欢迎各位同仁扫描下图二维码预约观看! Meridian迈迪安是全球主要的免疫诊断原料生产商,成立46年来在病毒学、细胞培养学、蛋白表达和纯化方面的专业知识使迈迪安已成为传染病诊断领域的佼佼者。 例如,迈迪安开发的风疹抗原(#6200),是全球首个天然风疹抗原,至今依然是最主要和最大的供应商。甲肝(#8505)、肺支(#R02102)、肺衣(#R02620)和幽门杆菌 (#R92101),均是全球领先的原料。迈迪安研发的传染病类的抗原抗体广泛地用于全球超过300个FDA和CE注册的检测中,具有足够的临床数据的验证。 迈迪安为150+疾病诊断提供多达3500+产品,包括优质的抗体对、天然抗原和免疫阻断剂。46年来,迈迪安致力于与全球各行业诊断开发企业提供全面的解决方案,并与全球主要头部诊断企业建立了紧密合作关系。 下载迈迪安免疫原料全彩页 迈迪安的所有产品都可以提供商业大规模生产,符合ISO13485标准,并大量用于全球各种获得认证的商用检测中。 ↓ 欢迎联系关注和咨询订购 ↓ 关于北京迈迪安生物科技有限公司 Meridian Bioscience 北京迈迪安生物科技有限公司是Meridian Bioscience在中国设立的全资子公司。Meridian BioScience(以下简称:迈迪安)是一家全球领先的生物诊断公司,总部设立在美国,距今已有45年的历史。迈迪安公司分为诊断和生命科学两个部分,在中国地区的主营业务是生命科学产品,包括各种分子和免疫诊断检测的关键原料,如抗原抗体、免疫阻断剂、PCR和LAMP反应的聚合酶和优化的预混液、核苷酸等,为人体、动物、农业、环境及食品安全等各种检测提供全面的解决方案。45年来,迈迪安已经成为全球各领域诊断企业的首选原料供应商! |