你在做qPCR时是否遇到过这样的问题: • 阴性结果是真的没有病原体感染还是假阴性? • 有弱阳性扩增,是真的弱阳性还是非特异性扩增? • 我做的是POCT,直接使用样本扩增,没有扩增结果是因为有抑制了吗还是核酸没有释放出来? • 类似的,使用的是提取核酸作为模板,没有扩增,问题是核酸提取不够还是qPCR扩增有问题? …… …… qPCR检测用于体外诊断中要保证检测结果的可靠性和准确性,这对诊断的判断和采取及时的治疗措施非常重要。 比如说在新冠刚爆发初期,RT-qPCR检测假阴性的问题一度比较受关注,有一些阳性检出率甚至低于50%,这在重大传染性疾病防控中造成的影响是至关重大的。 常规的qPCR流程是:样品采集-运输-样品处理-核酸提取-反转录(RNA病毒)-扩增-结果读取。 检测出现阴性结果时,例如无扩增或Ct值偏大,我们需要判断的是反应是真的没有检测的目的基因表达呢,还是某个环节出现问题了呢? 通常来说引起假阴性结果的原因可能出现在以下几个环节: 为了避免这种假阴性的发生,需要使用阳性对照来对检测的各个环节进行监控,确保qPCR/RT-qPCR检测结果的可靠性和正确性。 qPCR检测中常见对照 2023年6月29日晚8点,迈迪安将举行线上直播,重点讨论分子qPCR检测中的质控流程,欢迎各位同仁观看交流,扫描下图中二维码即可预约: 关于北京迈迪安生物科技有限公司 Meridian Bioscience 北京迈迪安生物科技有限公司是Meridian Bioscience在中国设立的全资子公司。Meridian BioScience(以下简称:迈迪安)是一家全球领先的生物诊断公司,总部设立在美国,距今已有45年的历史。迈迪安公司分为诊断和生命科学两个部分,在中国地区的主营业务是生命科学产品,包括各种分子和免疫诊断检测的关键原料,如抗原抗体、免疫阻断剂、PCR和LAMP反应的聚合酶和优化的预混液、核苷酸等,为人体、动物、农业、环境及食品安全等各种检测提供全面的解决方案。45年来,迈迪安已经成为全球各领域诊断企业的首选原料供应商! |