现场快速检测（point‐of‐care testing，POCT）也称即时检测，由于减少了样本运输及实验室检测的一系列复杂处理过程，可直接在采样现场进行检测鉴定，显著缩短了检测时间，在传染病快速检测中发挥重要作用。
急性呼吸道感染（acute respiratory infection，ARI）是世界范围内引发急性病和致死性疾病的主要病因之一，在急性呼吸道感染中，90% 以上由病毒引起。常见的引发急性呼吸道感染的病原体有：冠状病毒、流感病毒、呼吸道合胞病毒、腺病毒和鼻病毒等。大多数呼吸道病毒具有感染力强、传播快、潜伏期短、发病急等特点。呼吸道病毒种类繁多，且感染后症状较为相似，因此诊断区分十分困难。
POCT在急性呼吸道感染检测中主要采用便携式、自动化的仪器设备，操作简单快捷，不要求特定的实验条件，适于基层医疗机构及现场使用。目前用于急性呼吸道感染的POCT方法主要包括免疫学方法和分子诊断技术，具体检测技术概述如下。 
一、逆转录聚合酶链式反应，RT-PCR 逆转录聚合酶链式反应（Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction, RT-PCR）技术。在RT-PCR中，样品中的RNA链被逆转录为互补DNA，再以此互补DNA作为模板通过PCR进行DNA扩增。根据不同的研究目的和设计细节可以将RT-PCR分为常规、套式、多重和实时RT-PCR等。
二、滚环扩增技术，RCA 滚环扩增技术(Rolling circle amplification，RCA)借鉴了自然界中环状DNA复制方式，扩增反应在37 ℃左右进行。其扩增效率高、种类多、应用广，产物为单链DNA(Single-stranded DNA，ssDNA)，与染色或探针联用直接结合可实现检测信号的放大，在生物检测等方面得到广泛的应用。RCA反应发生的关键在于构建一个完整的单链DNA环用于后续扩增，RCA成环方式包括粘性末端成环和平末端成环。RCA主要有线性RCA (Linear RCA，LRCA)、超分支RCA (Hyper branched RCA，HRCA)和多引物RCA (Multiple primer RCA)等。其局限性在于所需模板为环状DNA。
三、环介导等温扩增技术，LAMP 环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification, LAMP)是2000年Notomi等报道的一种新的核酸扩增技术，主要利用4种不同的特异性引物识别靶基因的6个特定区域在等温条件进行扩增反应，基因的扩增和产物的检测可进一步完成。与常规PCR相比，LAMP不需要模板的热变性、温度循环、电泳及紫外观察等过程，具有简单、快速、特异性强的特点。值得注意的是，由于LAMP的高灵敏度和高产率等特点，LAMP容易产生气溶胶污染，因此如何集样本前处理、核酸等温扩增和结果判读于一体也是LAMP广泛应用于病原体POCT检测的发展方向之一。
声明：
1、凡本网注明“来源：小桔灯网”的所有作品，均为本网合法拥有版权或有权使用的作品，转载需联系授权。
2、凡本网注明“来源：XXX（非小桔灯网）”的作品，均转载自其它媒体，转载目的在于传递更多信息，并不代表本网赞同其观点和对其真实性负责。其版权归原作者所有，如有侵权请联系删除。
3、所有再转载者需自行获得原作者授权并注明来源。
关闭 官方推荐  /3 
| 
浙公网安备33010802005999号
