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性能领先的新一代核酸等温扩增技术——多酶快速恒温扩增 MEIA

2022-9-30 11:13| 编辑: 归去来兮| 查看: 4988| 评论: 0|来源: 宝锐生物

摘要: 宝锐生物MEIA原料酶来源于噬菌体、细菌等多种生物体。


什么是MEIA?

.01


新冠疫情在影响人类生活习惯的同时也在默默推动着疾病快检行业的迅速发展。能否以最短的时间,最简单的操作方式高效地发现病原体,是人类战胜新冠及其他传染病的重要前提。

然而传统的核酸诊断技术存在检测时间长、仪器价格昂贵等缺点,难以快速响应疫情防控的需求,市面上急需高效便捷的分子诊断新产品。
宝锐生物基于完善的分子生物学技术以及开发平台,经过反复技术验证与革新,开发了性能领先的新一代核酸等温扩增技术——多酶快速恒温扩增MEIA(Multi-Enzyme Isothermal Amplification)。该技术通过多酶协同作用,实现35-42℃较温和的反应温度下扩增反应时间3-15分钟。结果可结合琼脂糖凝胶电泳、荧光探针和胶体金试纸条等多种方法进行判读。

MEIA技术原理

.02


宝锐生物MEIA原料酶来源于噬菌体、细菌等多种生物体。经过基因工程技术突变进化后筛选出来的匹配度极高,符合我们MEIA技术所需的蛋白。

其技术原理与重组酶聚合酶扩增RPA技术相似,经改造的重组酶在常温下可与引物DNA紧密结合,形成重组酶-引物复合体,侵入到双链DNA模板中。在侵入位点重组酶将双链打开成单链,同时单链结合蛋白结合在被打开的单链上,使双链模板维持开链状态。

重组酶-引物复合体开始对双链进行扫描,当引物在模板上找到与之互补配对的序列时,重组酶-引物复合体解体,DNA聚合酶结合到引物的3’端,开始合成新链。合成的新链又可以作为模板,最终扩增产物以指数级增长,完成靶标基因的扩增。经过荧光标记的探针与扩增产物结合,当探针被核酸外切酶酶切后发出荧光信号,就会发出荧光信号,通过仪器检测荧光信号来实时监控扩增。

MEIA技术原理图


MEIA特点

.03


01

操作简单


非专业人员经简单的指导即可完成实验操作,反应无需热循环,彻底摆脱仪器束缚,甚至用人体体温孵育都能实现扩增反应。


02

反应高效


扩增反应时间3-15分钟,与传统PCR技术相比扩增更高效。


03

低温扩增


反应温度在35-42℃之间,条件温和,全程恒温。单一孵育温度降低对设备的需求,可使用水浴锅等恒温设备代替价格昂贵的PCR仪进行孵育,大大降低检测成本。


04

可冻干


MEIA技术与冻干技术相结合,形成冻干形态的MEIA核酸扩增试剂。冻干试剂可在室温下运输,使用更方便,有利于实现现场快速检测,提高检测效率。


05

应用广泛


可与CRISPR技术结合,开发出高灵敏度的试剂;与胶体金技术结合,开发便携式检测卡;与荧光探针结合,开发超高灵敏度的实时荧光检测试剂。

试剂盒

.04


宝锐生物在MEIA技术平台基础上,开发超高灵敏度的实时荧光检测试剂:快速恒温扩增试剂盒(MEIA Probe),可用于DNA与RNA模板的高灵敏检测。



MEIA恒温扩增

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