CE | 关于评估新冠快速抗原检测的标准和临床验证研究的背景文件

本文件是对定义、范围、考虑因素和标准的补充，适用于评估卫生保障委员会制定的COVID-19快速抗原检测通用清单中定义的COVID-19诊断快速抗原检测的临床性能的独立验证研究。该文件反映了技术工作组中来自成员国的技术专家的意见和讨论，该工作组还编写了上述临床验证研究的性能标准。

本文件提供了性能标准中没有包括的额外考虑。它们是为提高COVID-19快速抗原检测的临床验证研究的质量应考虑的建议。技术工作组可以考虑提出其中的一些建议，以便将来在共同清单文件中对性能标准进行更新。

2.1       审批用独立验证研究的临床标准

*  研究可能涉及与私人实体的合作或可能涉及私人实体的资助，但是，总有一个公共机构参与其中，并且该研究是客观地、为了公共利益而进行的；

*   研究应该由独立的实验室进行，即不属于测试的生产商或赞助者，也不由其经营，并且与经营者没有所有权、家族关系，也没有合同或其他关系，导至实验室被经营者控制或受其共同控制；

*   研究最好是基于前瞻性的临床现场研究设计，对未经选择的有症状和无症状的参与者进行SARS-CoV-2感染测试。在2022年5月之前，基于回顾性体外研究设计进行的独立验证研究，使用SARS-CoV-2参考板测试快速抗原的临床表现，也将被接受[1]；

*   “未选择”意味着事先不知道SARS-CoV-2的诊断（如通过PCR确定）；允许根据一般可能的COVID样症状（或与COVID-19病例密切接触）纳入；允许排除儿童（如<16岁）或医学伦理许可的原因；

2.2       建议

应提供利益冲突声明。它应包括是否接受了私人合作伙伴或生产商的资助，以及没有人在生产商公司、股票文件中拥有个人利益，或在过去3年内曾在那里工作。

理想情况下，公共机构应参与研究的设计、监督和分析。然而，由于各成员国的安排不同，可以考虑由其他组织进行的研究，并由公共机构书面认可。

公共机构是指主要由国家资助并在公共卫生领域发挥作用的公共实体（政府机构、地区政府办公室、公立医院）。

应提供研究的地点和时期。

3.1       审批用独立验证研究的临床标准

前瞻性临床现场研究：

*   在症状发生后的头七天内对未选择的无症状参与者或无症状参与者进行测试时，如果在独立的现场研究中通过RT-PCR确认了诊断，则灵敏度超过80%将被接受；

或

在对未经选择的参与者进行独立评估时，对于Ct<25的受试者，检测方法的灵敏度应达到90%或更高；

*  研究人群应明确界定，说明参与者的纳入标准（有症状的个人、密切接触者或没有已知暴露的无症状者）。理想情况下，每组的灵敏度应可从报告中看出。应描述RT-PCR方案和Ct值的分布。样本应代表自然发生的病毒负荷；

*  在独立验证研究中考虑的目标人群应以至少100个RT-PCR阳性样本和至少300个RT-PCR阴性样本为基础。每种标本类型应分别进行评估；

*   检测方法应具有98%以上的特异性。

回顾性的体外研究：

*   当测试参考样本盘的所有标本时，灵敏度超过80%将被接受；

或

对于Ct<25的受试者，检测方法的灵敏度应达到90%或更高；

*   参考样本盘的组成应如下：

• 一个由至少50个汇集的临床标本组成的样本盘，涵盖自然发生的病毒负荷，每毫升标本的SARS-CoV-2浓度约为1.1 × 10^9至4.2 × 10^2个基因组拷贝，Ct值在17和36之间。

  
  

• 整个评估样本盘应细分为三个亚组，其特点是：

•  极高病毒载量（Ct值17-25；约占汇集的临床标本总数的40%）；
  

• 高病毒载量（Ct值25-30；约占汇集的临床标本总数的40%）；和
  

• 中度病毒载量（Ct值30-36；约占入库临床标本总数的20%）。

• 每个样本库最多可使用10个为常规诊断获得的不同病毒载量的临床呼吸道标本（鼻咽/口咽）。每个样本盘成员的样本量应该足够，以便能够与纳入评估的不同测试进行比较评估；
  

  
  

• 需要应用RT-PCR来确定每个库的RNA负荷；

  
  

• 必须得到机构审查委员会的伦理批准；

  
  

• 对于每个快速抗原检测和样本盘成员，需要使用各自检测提供的标本收集装置，如拭子，完全吸收预先确定的等分；

  
  

• 其他步骤需要严格按照各自的使用说明（IFU）进行；

  
  

• 在样本盘的准备过程中，必须考虑样本盘（抗原）的稳定性，以及到测试的工作流程。

*   根据回顾性体外评估研究或生产商在IFU中的规定，检测方法应具有98%以上的特异性。

3.2       建议

对于Ct ≦ 25的受试者，检测方法的灵敏度应达到90%或更高。理想情况下，研究人群至少包括30名Ct < 25的参与者。

必须提供所有阳性PCR样本的Ct值的分布和个别结果以及相应的抗原检测结果。

应提供PCR阳性/抗原阳性样本的相关性分析，按Ct值或IU/ml分层。应包括抗原阴性/PCR阴性样品和抗原阴性/PCR阳性样品的结果（Ct值或IU/ml）的相关性。

应描述PCR方案，包括平台的类型、扩增的基因目标和使用的任何参考材料。

特异性的数值可以结合不同的研究。

4.1       审批用独立验证研究的临床标准

前瞻性临床现场研究和回顾性体外研究：

*   应明确界定研究人群，说明参与者的纳入标准（有症状的个人、密切接触者或没有已知暴露的无症状者）。理想情况下，每组的灵敏度应可从报告中看出。应描述RT-PCR方案和Ct值的分布。样本应代表自然发生的病毒负荷。

*  在独立验证研究中考虑的目标人群应以至少100个RT-PCR阳性样本和至少300个RT-PCR阴性样本为基础。每种标本类型应分别进行评估。

*  根据MDCG关于SARS-CoV-2体外诊断医疗器械性能评估的指导意见[2]，优先考虑将样本与鼻咽拭子的RT-PCR结果进行比较。然而，在独立的验证研究中，如果提供理由，样品也可以与口咽或鼻拭子上的RT-PCR结果进行比较（例如，在评估儿童中快速抗原检测的临床表现时）。

4.2       建议

阳性样本应在症状出现后的头七天内或已知的感染时间内采集，同时考虑到潜伏时间。

取样应与抗原和NAT检测相匹配，例如，从每个人身上同时取两个样本，或者最好从同一个样本（例如从一个拭子的洗脱液）进行NAT和抗原检测；缓冲液/运输介质应与NAT和抗原检测兼容；用于样本吸收的缓冲液/介质的任何体积变化与专有检测不同，和/或在抗原和NAT检测之间应明确告知。每种标本类型应分别进行评估。所有声称的标本类型应与来自鼻咽或口咽标本的配对NAT结果进行比较。

应该对IFU中描述的每种标本类型进行评估。分析和样品储存应明确描述并按照IFU进行。测试样本和参考样本最好按顺序抽取。总的来说，与NP拭子相比，OP拭子在检测阳性样品方面的表现似乎略差。然而，样品的采集（拭子所用材料的质量）、处理（储存、在介质或干拭子中运输）、实验室协议（如用于提取和PCR的方法）和（研究）人群等都可能影响特定样品类型的整体性能。