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宠物诊断领袖的看家绝技,妙!

2021-8-7 12:48| 编辑: 小桔灯网| 查看: 2584| 评论: 0|来源: IVD工具人

摘要: 上图从从左往右,4个箭头,分别指:加样孔判读窗口激活信号孔激活按钮,可以按下去根据这个描述,能推测到,与普通的层析相比,还有一个激活的步骤。首先,SNAP没有采用胶体金,而是采用HRP催化TMBHRP:辣根过氧化物 ...


上图从从左往右,4个箭头,分别指:

  • 加样孔

  • 判读窗口

  • 激活信号孔

  • 激活按钮,可以按下去


根据这个描述,能推测到,与普通的层析相比,还有一个激活的步骤。



首先,SNAP没有采用胶体金,而是采用HRP催化TMB

HRP:辣根过氧化物酶

TMP:3,3', 5,5'-四甲基联苯胺


所以SNAP的试纸上没有金。


过程一

样本(全血,血清,血浆)与标记了HRP的抗体溶液混合,完成HRP-Ab与Ag的反应,形成 Ag-Ab-HRP复合物。


过程二

将混合后的溶液加入上图中的加样孔


过程三

Ag-Ab-HRP复合物,顺着膜网上层析,与膜上的包被的Ab反应,形成Ab-Ag-Ab-HRP复合物


过程四

溶液出现在激活信号孔,于是按下激活扳机。


这里解释下,激活扳机被按下去后,激活扳机下方的两个溶液仓,分别是清洗液仓,TMB溶液仓,分别被刺破,溶液渗出。


在加样孔下方,有一个厚实的吸水垫,本来与试剂条处于隔离状态。当样本溶液进入加样孔,溶液大部分都是往上层析的。


一旦激活扳机被按下之后,这个这个吸水垫就和试剂条直接接触了。于是它开始回吸溶液。


过程五

被刺破的清洗液仓流出的清洗液,顺着试剂条向着加样孔方向流动。在这个过程中,没有被膜上Ab捕获的Ag-Ab-HRP复合物,又有一次机会被抓住。


同时,不停流动的清洗液,也将多余的Ab-HRP,全部吹走。


过程六

同时被刺破的TMB溶液仓,紧随其后,跟着清洗液后面向加样孔流动。TMB流过Ab-Ag-Ab-HRP复合物时,HRP催化TMB,生产蓝色的物质,并且沉淀。形成可观察的斑点。


点评:

老产品,老设计,但是非常经典。IVD工具人推送过的一个微流控ELISA,通过控制各个通道的液体流速来完成清洗,催化底物。异曲同工之妙。

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