IVD工具人课堂 第三期 - 层析原理进阶版，花样设计

大家好，我们POCT层析产品的方法学原理，大家都知道有夹心法、竞争法、捕获法或者说是间接法。

为了满足某些项目的特别需求，在原来的基础上衍生出了一些更为复杂的方法，接下来给大家介绍四种衍生出来的方法学原理。

第一个是夹心竞争法，又称中和抑制法

将夹心法和竞争法组合在一起，比如检测某抗体，我们在样品垫上处理对应的抗原Ag，标记垫标记对应的抗体Ab1，T线上也包被对应的抗体Ab2。

当样本为阳性时，样本中的抗体与样品垫的抗原结合，形成Ab-Ag1复合物，然后再与标记的抗体Ab1结合，形成Ab-Ag1-Ab1-Au复合物，该复合物将不在与T线反应，结果不限色。

当样本为阴性时，样品垫的抗原与标记的抗体Ab1结合，形成Ag1-Ab1复合物，然后该复合物与T线的Ab2结合，形成Ab2-Ag1-Ab1-Au复合物，结果显红色。

该方法主要是用于某些抗原性能好，但是不适用于标记，或者手头上可用抗原只有一个不能双抗原夹心（或者双抗体夹心）的项目。

第二个是夹心捕获法，

将夹心法和捕获法组合在一起，比如检测某抗体IgM，我们在样品垫上处理对应的抗原Ag，标记垫标记对应的抗体Ab，T线上包被对应的抗人IgM抗体。

当样本为阳性时，样本中的抗体IgM与样品垫的抗原结合，形成IgM-Ag复合物，然后再与标记的抗体Ab结合，形成IgM-Ag-Ab-Au复合物，该复合物继续与T线的抗人IgM二抗结合，形成抗人IgM抗体-IgM-Ag-Ab-Au复合物，结果显红色。

当样本为阴性时，样品垫的抗原与标记的抗体Ab结合，形成Ag1-Ab-Au复合物，然后该复合物不与T线的抗人IgM二抗结合，结果不显色。

该方法主要也是用于某些抗原性能好，但是不适用于标记，需要通过相应的抗体来连接，与后面的搭桥标记类似。

第三个是生物素-链霉亲和素+夹心法，

将生物素和链霉亲和素引用进来，可以达到放大信号的效果，提高灵敏度。比如检测某抗原，我们在样品垫上处理对应的抗原Ab1-Bio，标记垫标记对应的抗体Ab2，T线上包被SA。

当样本为阳性时，样本中的抗原与样品垫的抗体Ab1结合，形成Bio-Ab1-Ag复合物，然后再与标记的抗体Ab2结合，形成Bio-Ab1-Ag-Ab2-Au复合物，该复合物与T线的SA反应形成SA-Bio-Ab1-Ag-Ab2-Au复合物，结果显红色。

当样本为阴性时，样品垫的抗体Ab1与T线的SA反应形成SA-Bio-Ab1复合物，结果不显色。

该方法主要是用于提高产品的灵敏度，因理论上一个SA可以结合4个Bio，不过特异性也会经受较大考验，且样本中的生物素会给结果带来风险。

第四个是夹心法-搭桥标记，

该方法主要是在标记端与常规方法不一致，因某些抗原不适用于标记，这个时候我们将这个重组抗原加入一段标签，然后再对这段标签制备对应抗体，用胶体金标记标签抗体，然后与标记抗原结合，形成Ag1-Ab-Au复合物。其他过程跟双抗体夹心一致，这里就不在加以解释。

还有什么其他的衍生方法呢，欢迎在留言区与大家分享，谢谢！

作者介绍：

水木木，在外资企业进行层析产品开发工作多年，现在进入IVD上游原材料企业，任技术销售。有需要联系作者的，请添加微信。