上转发光法技术

1.上转发光法定量与胶体金方法的区别

上转发光法原理：上转发光免疫分析仪是一种基于上转换发光技术(UPT)的光电检测仪器，通过对利用上转换发光材料（UCP）作为标记物的免疫层析试纸条上的UCP颗粒的分布状态进行测量、分析与处理，给出样品中目标被检物的浓度。做到对待侧样本的快速、准确定量检测。

在上转发光免疫分析仪的具体工作过程中，首先激光器发射红外光，红外光照射到与检测卡结果扫描窗对应的分析膜部分（包括检测带与质控带）；分析膜上存在的UCP颗粒受红外光激发产生可见光，照射于光电倍增管上，光信号转换成电压值；便得到与试纸条某一具体位置上UCP颗粒存在量对应的检测信号值；在此基础之上，通过多功能采集卡驱动电机，使检测卡随滑动平台滑动，从而得到与检测卡分析膜上间隔固定的每一个位置对应的检测信号值，即实现以UPT免疫分析仪对检测卡进行扫描检测。最终的结果以具体数值以及扫描曲线的形式给出。

胶体金免疫层析技术原理：将特异性的抗原或抗体以条带状固定在膜上，胶体金标记试剂（抗体或单克隆抗体）吸附在结合垫上，当待检样本加到试纸条一端的样本垫上后，通过毛细作用向前移动，溶解结合垫上的胶体金标记试剂后相互反应，再移动至固定的抗原或抗体的区域时，待检物与金标试剂的结合物又与之发生特异性结合而被截留，聚集在检测带上，可通过肉眼观察到显色结果。

区别：上转发光法试纸条反应后无颜色变化，肉眼无法判读，必须通过接收器接收测试卡上激发出的可见光信号，光信号转化成电压值，最终转换为浓度，是属于发光技术。

胶体金试纸条反应后会有颜色变化，且颜色变化有深有浅。可通过肉眼或机器判读其颜色变化，从而定性检测。属于传统的检测技术。

2.上转发光免疫分析仪及配套试剂的质控

以fFN项目举例说明：

胎儿纤维连接蛋白（fFN）定量测定试剂盒（上转发光法）应用双抗体夹心免疫层析法。试纸条上的NC膜上反应区(T线)用胎儿纤维连接蛋白（fFN）抗体包被，质控区(C线)用羊抗鼠包被。测试时，将标本和稀释液滴入试纸条加样处上，液体在毛细管效应下向上层析。标本中的fFN在层析过程中先与UCP标记的抗fFN抗体结合，然后继续往上层析，随后结合物会被包被在T线上的fFN抗体结合，在T线位置会形成固相FFN抗体-抗原-标记fFN抗体-UCP颗粒复合物。在C线则形成固相羊抗鼠-标记fFN抗体-UCP颗粒复合物。UCP颗粒在激发光下发出可见光信号，T线信号和C线信号的比值(T/C)与样本中的fFN抗原浓度成正比，用校准品的T/C值和浓度作标准曲线，从标准曲线上可求出待测样本中的fFN的含量。

也就是说，通过上转发光免疫分析仪测得的有两个可见光信号，分别是C线（质控品）信号和T线（测试品）信号。T线信号和C线信号的比值(T/C)与样本中的fFN抗原浓度成正比。所以在仪器屏幕上能看到的有两个峰，由于质控品的浓度是固定的，所以通过T/C值即可计算出测试品浓度，最终显示在仪器界面上。

测试卡内自带有参数卡（芯片），可自动识别当前检测项目名称、单位、线性范围等信息。

其他项目的检测原理基本与此一直，只是测试卡内所包被的抗体不一样。