从IVD试验员到项目经理：（52）再说临床试验中的样本入组

问题1：样本入组的时间是如何计算的？或者说第一例样本是什么时间或情况下开始入组的？

答：样本入组应是项目立项后，项目正式启动时方可进行。

问题2：项目正式启动是以什么条件为节点呢？

答：项目正式启动一般情况下以启动会为起点，临床研究项目完成前期的临床承接单位的项目伦理审议以及临床试验研究合同的签署；临床研究项目的药监局备案后即可启动项目，这时候应该举行项目启动会议向各方参与人员宣布项目的启动。如果没有召开项目启动会议的，也建议使用其他比较正式的例如：书面通知、邮件等方式确认项目正式启动。这时候样本就可以开始入组。

问题3：对于项目中需要使用回顾性样本的要如何入组？回顾性样本必然是早于项目启动时间的。

答：以上的这三个问题是在群里经常有网友提出的，特别是第三个问题。所以今天就这个问题我想仔细的来讨论一下。

首先必须说明，对于样本的使用问题在现行的《体外诊断试剂临床试验技术指导原则》没有任何的规定，那么对于IVD这个比较特殊的品种来说，为了尽快的完成临床试验研究很多项目都在临床试验研究中使用临床承接单位保存的样本，更有甚者出现了三类1000例临床样本中有900例是临床承接单位保存样本的情况。

虽然后来审评中心规定了临床试验研究中必须有不少于50%的新鲜样本，但这个规定仅为约定俗成罢了。

但是，在2018年公布的《体外诊断试剂临床试验指导原则（征求意见稿）》中明确的将样本区分为：前瞻性样本和回顾性样本。

“如果受试者纳入及样本采集是按照该临床试验规定的受试者选择要求进行的，则该临床样本为前瞻性样本；

如受试者样本的采集是基于其他临床研究的受试者选择要求，或并未依据任何临床研究的规定，则该样本对于本次临床试验为回顾性样本，例如来自某些样本库的样本。”

所以为了说明问题，后续对于样本的表述均使用：前瞻性样本和回顾性样本。

1、回顾性样本使用必须在临床试验方案中明确表述

我们都很清楚，一个IVD产品上市以后所需要检测的样本一定是前瞻性样本，所以作为模拟今后使用的临床试验研究过程，使用前瞻性样本是临床试验研究的根本核心。但是对于有些项目，例如临床发病率很低的项目，部分虽然发病率不算低但由于其他原因难以获得样本的项目来说，要完成临床试验研究且需要保证足够的疾病组样本，必然需要选择回顾性样本。这个是选择回顾性样本的根据。所以，对于一个具体项目是否需要使用回顾性样本应该在临床试验方案中明确表述，且应该说明回顾性样本的数量占据临床总样本数量的比例。

2、回顾性样本的保存条件应该在说明书中明确表述

所谓回顾性样本的保存条件不言而喻应该至少包括：保存的温度、保存的时间以及保存的形式。

保存的温度：样本保存的最终温度。

保存的时间：是指样本离体经过处理后能够满足具体项目检测（待评价产品所检测的目标待测物）可以允许的保存时间，这个时间必须是以试验为基础的。

保存的形式：在IVD临床研究中所明确的样本类型应该是与《全国临床检验操作规程》中规定的样本类型，例如血液样本、尿液样本等，但这些类型的样本并不都可以进行长期保存，所以部分样本如果要进行贮存需要进行一定的处理，例如提取其中的DNA等等。

所以，如果是使用回顾性样本的临床试验研究必须要注意除了我们比较常见的保存的温度和保存的时间，还需要了解这个拟入组的经过处理的样本其原始类型是否与本次临床试验研究中规定样本类型一致。

例如，一个规定检测血液中某个特定基因的临床研究项目由于检测的是样本中的DNA，那么回顾性样本的选择也是保存的DNA，但这时候就需要去溯源这个回顾性样本的DNA是否真实的来自血液。

3、关于回顾性样本的入组

很明确，回顾性样本的入组时间也应该是项目正式启动以后。

如果某个样本为回顾性样本，那么其采集的时间是与本次临床试验研究项目无关的，但这个样本的入组时间必须在项目启动之后。

4、一个比较特别的问题

今天在Q.Q群（49922581）里有位网友提了这样的问题：如果某个样本的保存时间是5天，那么如果我要做这个样本的回顾性样本入组，假设临床启动会是2019年1月2日召开的，那么倒推这个5天的时间就是2018年12月29日，2018年12月29日—2019年1月1日之间的样本才可以作为回顾性样本进行入组。

实际上，这个问题我不是很清楚就是为了单纯讨论问题而假想的还是真实的项目就是这样一个情况。但就问题本身来说，这个例子是比较特别的。

首先，这个样本的保存时间很短，只有5天的时间，说明目标待测物是不稳定的，离体后会慢慢的变化。对于这样短暂的保存时间来说，临床一般的做法应该是样本一旦离体就需要开始进行检测，避免由于贮存而造成检测结果的偏差，所以这样短的时间是否存在回顾性样本需要项目确认。

其次，就算是真的存在这样保存5天的回顾性样本，由于其目标待测物的稳定性的问题，所以这样的样本入组时间不应该是以项目启动会为临界点，而应该以样本真正能够开始试验的时间为临界点，甚至应该是今天要进行项目的临床试验，然后倒推之前的5天之内的样本方可入组并在当天完成所有的试验工作。

为什么要这么做？很简单就是因为目标待测物不稳定，尽可以保存5天的时间。如果项目以临床启动会为这样的回顾性样本入组时间，而样本入组之后没有及时的检测，其保存的时间完全有可能超过了规定5天时间，那么这时候所有入组的样本都将不能使用。

所以，对于回顾性样本的使用大家应该务必小心谨慎。