编者按: 本次章节新增篇章,为真菌分篇篇章。包含了:真菌相关的知识点。 关键词:医学真菌。 其意义在于概括了真菌概论。 一 真菌概述 节选《真菌性皮肤病》 上海交通大学医学院 真菌 真菌(fungus):是一类具有细胞壁和典型细胞核结构,缺乏叶绿素,不分根、茎、叶,能进行无性或有性繁殖的真核细胞型微生物。 胞壁不含肽聚糖,故不受青霉素、头孢菌素的影响;胞膜含固醇对二性霉素B、制霉菌素(与固醇结合)、酮康唑(抑制固醇合成)敏感。 组成:核膜和核仁(细胞核) 完整的细胞器(胞浆) 单细胞(少数)或多细胞(多数) 生存方式:腐生或寄生 繁殖方式:有性或无性 多数对人类有益,少数有害 分布广泛、种类繁多 少数有害:医学(病原)真菌400种,常见的有50~100种。 目前真菌病呈明显上升趋势: 1.抗生素、抗肿瘤药物、免疫抑制剂等的滥用 2.器官移植、介入性治疗等新型技术的开展 3.艾滋病、糖尿病、恶性肿瘤等疾病造成宿主免疫功能低下 二 真菌分类 形态:多种多样 有典型的核结构和细胞器 按形态、结构分为两类: 单细胞真菌 多细胞真菌 单细胞真菌 圆形或椭圆形 包括:酵母型真菌:无菌丝,母细胞以芽生方式繁殖,菌落与细菌的菌落相似。 类酵母型真菌:母细胞以芽生方式繁殖,出芽产生的芽生孢子持续延长,但不断裂、不与母细胞脱离,产生相互连接成藕节状较长的细胞链,可伸入培养基内,称假菌丝 。 多细胞真菌 基本结构:菌丝和孢子 菌丝(hypha):孢子生出嫩芽,称为芽管管逐渐延长呈丝状,称为菌丝。 孢子(spore):真菌的生殖结构,由生殖菌丝产生。 菌丝体(mycelium):菌丝交织成团。 根据功能不同分为: 营养菌丝(vegetative mycelium) 气生菌丝(aerial mycelium) 生殖菌丝(reproductive mycelium) 根据隔膜的消长分为: 有隔菌丝(大部分病原性丝状菌) 无隔菌丝 根据形态不同分为: 单纯菌丝 球拍状菌丝 破梳状菌丝 螺旋状菌丝 结节状菌丝 鹿角状菌丝等 孢 子 生殖结构,由生殖菌丝产生,是鉴定和分类的主要依据。 无性孢子 不经两性细胞配合而产生的孢子。病原性真菌大多数产生无性孢子。 o叶状孢子(thallospore) 芽生孢子(blastospore) 关节孢子(arthrospore) 厚膜孢子(chlamydospore) o分生孢子 (conidia) 大分生孢子(macroconidia) 小分生孢子(microconidia) o孢子囊孢子(sporangiospore) 有性孢子 细胞间配合(质配和核配)后产生,绝大多数为非致病性真菌所具有。 o接合孢子 o子囊孢子 o担(子)孢子 三 真菌的繁殖与培养 依靠孢子及菌丝进行繁殖 繁殖方式: 无性繁殖——真菌的主要繁殖方式 有性繁殖 无性繁殖主要包括: 芽生 母细胞发芽产生。常见于酵母型和类酵母型真菌。 裂殖 母细胞二分裂产生。如裂殖酵母。 芽管 萌发芽管,伸延形成菌丝。 隔殖 分生孢子梗形成一隔膜,原生质浓缩形成新孢子。 培养特性 培养基:营养要求不高,常用沙氏葡萄糖琼脂培养基(SDA)、马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA)、察氏培养基(Czapek-Dox Agar)、脑心浸膏琼脂培养基(BHI) 温度: 37℃(酵母型和类酵母型真菌) 25~28℃(丝状真菌) 最适pH:4.0~6.0 生长速度:多数病原性真菌生长缓慢 四 菌落 1.酵母型菌落 芽生孢子,无菌丝。如新生隐球菌 2.类酵母型菌落(酵母样菌落) 呈藕节状细胞链的假菌丝。 如白假丝酵母 3.丝状型菌落 菌落形态和颜色可作为鉴定、分类的参考依据。见于大多数丝状真菌 o变异性 形态、结构、及生理性状(毒力)等。 o抵抗力 对热抵抗性不强(孢子60℃经1 h即杀灭)耐受:干燥、紫外线及多种化学药物等敏感:1% ~3%石炭酸、2.5%碘酊及10%甲醛液。 五 真菌感染 真菌感染 o原发性感染: 致病性真菌 球孢子菌(coccidiodes) 皮炎芽生菌(blastomyoes dermatitidis) 组织胞浆菌(histoplasma) 马尔尼菲青霉(penicillium marneffei)等 o继发性感染: 机会致病性真菌 机体免疫功能显著下降时发生 真菌性超敏反应 按性质分类: 感染性超敏反应: 感染,Ⅳ型 接触性超敏反应: 吸入或食入,Ⅰ~Ⅳ型 按部位分类: 皮肤超敏反应 呼吸道超敏反应 消化道超敏反应 真菌毒素中毒 o来源:真菌代谢产生毒素,存在于农作物、食物或饲料中 o表现: 1. 肝、肾、神经、造血系统等损伤 2. 致癌(黄曲霉毒素等) 真菌免疫性 o非特异性免疫 1.皮肤粘膜屏障作用 2.正常菌群拮抗作用(白假丝酵母菌) 3.吞噬作用 o特异性免疫 1.细胞免疫 2.体液免疫 六 真菌实验室检查 实验室检查 1.样本采集: o浅部:鳞屑、病发或甲屑 o深部:痰、脓、血、尿、便、脑脊液、胸水及分泌物等 o注意:标本应足量、新鲜严格无菌操作资料应齐全 2.形态学检查: o直接镜检: 标本处理(10%KOH) 涂片染色(革兰染色、墨汁染色) o分离培养: 含抗生素和放线菌酮的SDA、PDA 酵母型和类酵母型真菌: 37℃,革兰染色 丝状真菌:25℃,乳酸酚棉兰染色 3.血清学检测: 真菌抗原、代谢产物及机体产生的抗体 o抗原:1,3-β-D-葡聚糖(G试验) 甘露聚糖(EIA法或FACE) 半乳甘露聚糖(GM试验) 隐球菌荚膜多糖(乳胶凝聚试验) o抗体:甘露聚糖抗体(凝胶对流电泳) 烯醇化酶抗体(凝集试验) 马尔尼菲青霉抗体(ELISA法) o代谢产物: D-阿拉伯糖醇(酶荧光法) 烯醇化酶(斑点印迹法或DFA) 4.核酸检测: o核酸G+C mol%测定 oPCR相关技术:巢氏PCR、复合PCR、荧光PCR等 oDNA指纹技术:RFLP、DGGE、SSCP等 o核酸杂交:原位杂交、RDB、基因芯片技术等 oDNA特殊序列分析:ITS、LSU、TEF、线粒体cyt b、COⅠ和COⅡ、b-微管蛋白等基因 5.抗真菌药物 o皮肤癣菌: 注意清洁卫生,避免接触,局部使用特比萘芬、酮康唑、咪康唑或克霉唑 o深部真菌病: 去除各种诱因,提高抵抗力,常用氟康唑、伊曲康唑、伏立康唑、两性霉素B、5-氟胞嘧啶、卡泊芬净、米卡芬净等 o真菌性食物中毒:严禁食用发霉食品 |