一键启动——数字PCR实验

非诚勿扰孟非

数字PCR（Digital PCR，dPCR）是一种核酸分子绝对定量技术，它通过直接计数DNA分子的个数来实现对起始样品的绝对定量。
作为基于微流控的新一代PCR技术，这三点优势让它能在一众PCR检测手段中突出重围。
绝对定量：
数字PCR能够直接数出DNA分子的个数，实现对起始样品的绝对定量，避免了传统定量PCR中相对定量的局限性。
高灵敏度：
数字PCR能够检测出低频率的突变和表达变化，提高了检测的灵敏度和准确性。
可靠性：
数字PCR采用统计学原理进行数据分析，能够降低实验误差和假阳性率，提高结果的可靠性。
从实验流程上看，数字PCR检测可分为以下四个步骤：


图一：数字PCR检测标准流程展示
随着检测通量以及实验样本处理方式的复杂度持续升级，体系制备成为了让科学家们头疼的难题，主要体现在体系配置工作量大，手工重复性差，前处理耗时长等。
为帮助科学家们在体系配置上的难题，小贝为科学家们推荐一款辅助工具——Biomek i系列自动化移液工作站。
自动化ddPCR（微滴式数字PCR）体系配置
高通量处理：
自动化ddPCR系统能够一次性处理大量样本，大大提高了实验通量，减少了人工操作的时间和误差。


图二：以多重数字PCR检测重组腺相关病毒(rAAV)病毒基因组拷贝数实验流程为例，1小时可完成6*96个待测样本的体系配置。
降低人工成本：
自动化ddPCR系统可以减少对专业操作人员的依赖，降低人工成本。


图三：自动化软件dPCR全流程自动化程序展示。标准化实验流程，全自动化完成，无需人员进行实验操作
结果保障：
可重复性，精确度高，稳定的结果输出。



图A图B

图四：图A为自动化标准品梯度稀释试验，结果表明定量限可低至 20 拷贝/反应，检测限可至 5~10 拷贝/反应，ddPCR 方法能更好的用于标准品的定量和残留检测。
图B为 AAV 基因组滴度检测的代表性图谱，通过对 自动化AAV 样品的前处理，再通过 ddPCR 系统进行液滴生成并进行 PCR 扩增后读取液滴信号，结果表明使用 ddPCR 对病毒滴度进行检测，其结果阴阳性区分明显，易于分析，结果准确，并且相同样品不同天检测 CV 值 ≤10%。
未来数字PCR可拓展的应用领域：
精准医学：
数字PCR在精准医学领域的应用将进一步拓展，包括基因表达差异研究、拷贝数变异（CNV）研究、肿瘤治疗的伴随诊断等。通过数字PCR技术，可以实现对基因表达的精确定量，为疾病的诊断和治疗提供有力支持。
环境监测：
随着全球对生物安全和环境保护的重视，数字PCR在环境监测领域的应用也将逐渐增多。通过数字PCR技术，可以检测和监测环境中的致病微生物和污染物，为环境保护和公共卫生安全提供重要保障。
农业遗传改良：
在农业领域，数字PCR技术可以用于农作物基因变异的检测和分析，为育种工作提供有力支持。通过数字PCR技术，可以更加精确地检测和分析农作物中的基因变异，为培育高产、优质、抗病的农作物品种提供技术支持。
贝克曼库尔特生命科学提供专业的软件硬件支持，以及客户应用开发来满足大家对于生命科学自动化的需求。

关于贝克曼自动化整合部门介绍：

1	贝克曼库尔特生命科学自动化整合部门位于美国Indianapolis，该部门位于Beckman质量管理系统下，并经过ISO9001认证，部门配备整合实验室，完成整合设备的研发。
2	整合部门人员包含机械、电子、软件、系统工程师，和工程师支持、项目管理人员。人员配备齐全，售前售后响应快速。
3	如有特殊功能开发，Beckman团队可协助客户在国内进行软硬件开发和测试。

*以上内容涉及设备仅适用于科研和工业，不用于临床诊断。



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