盘一盘那些免疫检测：IF、IHC、ICC 到底有何不同？

检验之星

免疫荧光（Immunofluorescence，IF）、免疫组化（Immunohistochemistry，IHC）和免疫细胞化学（Immunocytochemistry ，ICC）都是极为常用的免疫检测技术，它们都基于抗原与抗体之间特异性结合的基本原理，通过标记物来对目标抗原进行检测和分析。尽管有相同之处，但在具体技术细节、样本处理以及应用方向上，三者存在着明显的差异。
首先了解一下这几个词的意思和组成的词根

词根	释义
Immuno	免疫技术（如，抗体和抗原的结合）
Histo	组织（细胞及周围的细胞外基质）
Cyto	细胞（不含细胞外的基质）
Chemistry	化学检测方法（如，颜色的变化）
Fluorescence	对被激发的荧光团的检测

原理大不同
免疫荧光（IF）：基于抗原抗体特异性结合，用荧光素标记抗体，在荧光显微镜下观察，荧光出现的位置和强度代表抗原的分布与含量。有直接法（荧光素直接标记抗体）和间接法（先加一抗，再加荧光素标记的二抗），间接法更常用，灵敏度更高。


免疫组织化学（IHC）：同样利用抗原抗体反应，以显色剂（如辣根过氧化物酶催化底物显色）标记抗体，使组织切片中抗原位置呈现颜色，便于在普通光学显微镜下观察，判断细胞或组织中化学成分及定位。


免疫细胞化学（ICC）：原理和上述二者相同，不过是对细胞内抗原进行定位、定性和定量分析，能了解抗原在细胞内的分布和含量变化。
样本处理有别
IF：样本可以是组织或细胞。处理时需先固定，保持细胞形态和抗原活性；再通透，让抗体进入细胞；最后封闭，减少非特异性结合。


IHC：主要用组织样本，常见石蜡切片和冰冻切片。石蜡切片要先脱蜡、水化，然后进行抗原修复，恢复抗原活性，以便抗体结合。


ICC：针对细胞样本，贴壁细胞或悬浮细胞都可以。先固定细胞，再根据需要进行通透处理，和IF样本处理类似。
应用场景各有侧重
IF：常用于细胞内蛋白定位和共定位研究，观察不同蛋白在细胞内的分布情况，也用于病原体检测，如检测病毒在细胞中的感染部位。
IHC：在肿瘤诊断和病理研究中应用广泛，帮助医生判断肿瘤类型、分级，检测肿瘤相关生物标志物，指导临床治疗方案选择。
ICC：多用于细胞生物学研究，研究细胞信号传导通路中关键蛋白的表达和分布变化，以及细胞分化过程中特定蛋白的表达调控。

接下来，小编也整理了一些实验中会遇到的问题，供大家参考！
        IHC＆ICC


        IF



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