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大多数微生物不能被培养的原因:
(1)部分微生物生长缓慢,尚没有敏感检测技术
- 自然环境中许多微生物都聚集生长,适合实验室培养条件下生长的微生物快速繁殖,大量摄取了培养基中有限的营养成分,从而使生长缓慢的微生物得不到充足的营养使生长受到抑制;
- 某些微生物即使能够在低浓度营养条件下生长,但在特定的培养条件下不能长成肉眼可见的菌落;
- 还有一类生存在寡营养环境下的微生物在平板培养基中不形成菌落,而是在表面扩散生长,仅形成几个细胞组成的小型集合;
- 衡量微生物生长状况的常规方法比如比浊法和计数法等都不能检测到这些微生物,表观上被认为“不可培养”;
- 由于缺乏清晰直接的形态学特征也很难在一个复杂的微生物群体中鉴定出需要的目的细胞。
(2)培养基中的营养成分相对比较丰富
- 自然界中可以利用高浓度营养物质的微生物很少,大彩数微生物处于“贫营养“生长状态
- 实验室中通常将需要贫营养的微生物置于丰富的营养环境中,微生物早期会快速生长,但同时产生大量的,微生物自身难以调节的过氧化物,超氧化物或羟基自由基等“毒性氧物质”,该类物质快速,过量的积累会破坏微生物细胞的内膜结构,由此产生一些应激机制如SOS来修复微生物,未及时修复的微生物将会死亡或表现为不可培养。
(3)忽视了环境中微生物之间的相互作用口(自然环境中微生物之间的相互关系非常复杂)
- 共生:是至少有一个群体为另一个群体提供其必需的生长因子从而使微生物群休获利
当它们之间的距离靠近时——可以生长
当微生物之间距离较远或不存在时——微生物不可培养
- 群体感应 它是微生物间通过感应一种信号分子来判断群体密度和环境的变化,启动相应的基因作出协调统一的应答,从而调节群体的生长
- 其他类型的关系 在实验室培养条件下,单纯地将待培养的微生物与其他相关的微生物群体分物种之间的信息交流被阻断,微生物因缺乏必需的生长因子和信号分子而无法生长,表现为不可培养。
(4)缺乏足够的认识,在实验室条件下无法实现原位培养
- 生存环境和自然条件相当复杂(如:微生物的多样性,自然环境中的化学因素,环境中生物与非生物因素之间的相互作用以及微生物水平上的全球生态系统的平衡等)
- 自然界中大部分微生物以群体的形式生长来交换中间代谢产物和信号分子
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