SCI赏图录（F）AnnexinV-PI凋亡实验

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<hr/>这是一个Annexin V/PI双染检测凋亡的典型数据，咱们先看懂结果，然后分别从实验原理，操作细节了解该实验。
大家看流式图中有四个象限：左上是细胞碎片，左下是正常细胞；右上是晚期凋亡细胞；右下是晚期凋亡细胞。知道了原理很容易明白。
什么是细胞凋亡。
细胞凋亡（Apoptosis）：属于细胞程序性死亡（Programmed Cell Death，PCD），是为维持内环境稳定，由基因控制的细胞自主的有序的死亡，属于细胞的“自杀”行为。蝌蚪褪去尾巴变成青蛙就是生物学中典型的细胞凋亡现象。


<hr/>实验原理
在正常细胞中，磷脂酰丝氨酸（PS）只分布在细胞膜脂质双层的内侧，而在细胞凋亡早期，细胞膜中的磷脂酰丝氨酸（PS）由脂膜内侧翻向外侧。Annexin V是一种分子量为35~36kD的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白，与磷脂酰丝氨酸有高度亲和力，故可通过细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸与凋亡早期细胞的胞膜结合。因此Annexin V被作为检测细胞早期凋亡的灵敏指标之一。将Annexin V进行荧光素（EGFP、FITC）标记，以标记了的Annexin V作为荧光探针，利用荧光显微镜或流式细胞仪可检测细胞凋亡的发生。碘化丙啶（Propidium Iodide, PI）是一种核酸染料，它不能透过完整的细胞膜，但对凋亡中晚期的细胞和死细胞，PI能够透过细胞膜而使细胞核染红。因此将Annexin V与PI匹配使用，就可以将处于不同凋亡时期的细胞区分开来。
细胞凋亡实操要点
染料加入一定要快，细胞处理一定要轻柔，流式细胞仪要先调整好参数。实验步骤一点也不复杂，通常还要加一个阳性对照组。


<hr/>实验结果处理通常使用flowJo，也可以使用流式细胞仪自带的软件进行分析。

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