细胞培养基能放在紫外灯下照？会对培养基中的成分造成损害吗？

生物科研实验室

紫外辐射（UV）作为一种普遍且高效的消毒手段，其原理在于能摧毁微生物的DNA结构，从而达到杀菌效果。然而，对于已灌装至容器内的细胞培养液而言，紫外线的照射可能会对其内含的蛋白质及其他易受影响的成分带来伤害，特别是当照射时间延长时。举例来说，B族维生素群及色氨酸在紫外线的照射下可能发生化学变化，进而丧失其原有功能。
由于紫外线的穿透力相对有限，普通玻璃材质与塑料能有效阻挡紫外线，因此，存放于离心管或其他容器内的培养液在紫外线的照射下所受的影响或许会较小。
但即便如此，对紫外线照射的时长与强度的把控依然至关重要。一般而言，建议将照射时间控制在15至30分钟之间，以期在最小化培养液成分损伤的同时，确保能消灭绝大多数常见的微生物污染源。
不过，鉴于不同品牌与配方的培养液存在差异，可能需要调整至最佳的照射时长与强度，以实现最佳的消毒效果，同时避免对培养液造成显著损害。
若对紫外线照射是否会对培养液产生不良影响存在疑虑，建议进行对照试验，即对比经过紫外照射与未经过照射条件下细胞的生长情况，以此来评估紫外线照射对特定培养液成分的影响程度。一、细胞培养液能否置于紫外灯下照射？不建议将细胞培养液直接置于紫外灯下照射。其主要原因包括：紫外线穿透力有限：尽管紫外线（尤其是UVC波段）的穿透力较弱，通常无法穿透玻璃容器，对培养液的直接影响较小，但若培养液直接暴露于紫外光下，特别是长时间照射，仍可能引发一系列问题。
可能导至蛋白质变性：紫外线的照射可能会破坏培养液中的蛋白质结构，尤其是含有血清的培养液中的蛋白质，因为紫外线不仅能破坏DNA引发突变，还可能对血清中的蛋白质造成不良影响。
产生臭氧：紫外线照射过程中会伴随臭氧的生成，这可能对培养液及细胞培养产生负面影响。臭氧具有强氧化性，可能导至蛋白质变性，尤其是血清中的未知成分，同时培养液中残留的过氧化氢也可能引发细胞的氧化应激反应。
对塑料材质的老化作用：紫外线和臭氧还可能加速塑料材质（如一次性培养皿、瓶、板等）的老化。
因此，为确保细胞培养的稳定性及培养液的质量，建议采用过滤法或其他适宜的消毒方法来处理培养液，而非直接采用紫外灯照射。若培养液不慎被照射了一段时间，但细胞生长状况良好，则可继续使用；然而，若照射时间较长，则建议更换新的培养液。二、若不能照射，会对哪些成分造成损害？损害程度如何？紫外灯照射细胞培养液可能会对其中的某些关键成分造成损害，具体包括：光敏反应成分：紫外线的照射可能激活培养液中的光敏物质，如核黄素（维生素B2）。核黄素在光照下会产生活性氧（ROS）及过氧化物，这些物质对细胞具有毒性。
氨基酸变化：紫外线照射可能导至培养液中的氨基酸发生变异，尤其是色氨酸、酪氨酸及组织胺。这些氨基酸在光照下可能形成光加合物，对细胞生长产生不利影响。
维生素B6降解：在紫外线的照射下，培养液中的维生素B6成分（包括氨磺胺和吡哆醇）会迅速分解。
抗氧化剂损失：紫外线照射还会导至培养液中的主要抗氧化剂丙酮酸盐含量显著下降，同时伴随乙酸及甲酸含量的增加。
血清稳定性：相较于DMEM培养基，血清对光照相对稳定，并能在一定程度上稳定培养液，对抗光诱导的生长能力下降。
光照射对细胞的影响：光照可能导至培养液中产生对细胞有害的因素，进而引发细胞死亡。通过去除DMEM中的光反应性成分，可以显著提高细胞在光照后的存活率。