超详细HE染色原理

生物医药

苏木精-伊红染色法，简称HE染色法，石蜡切片技术里常用的染色法之一。苏木精染液为碱性，主要使细胞核内的染色质与胞质内的核酸着紫蓝色;伊红为酸性染料，主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色。
       
一、染色原理
1、嗜酸型&嗜碱性
易于被碱性或酸性染料着色的性质称为嗜碱性和嗜酸性;而对碱性染料和酸性染料亲和力都比较弱的现象称为中性。
1)嗜碱性
嗜碱性是指组织和细胞内酸性物质成分对碱性染料(含有阳离子着色基团的染料，如苏木精、结晶紫、美蓝等)具有亲和性。
在普通染色法中，染色液的酸碱度为pH6左右，细胞内的酸性物质如细胞核的染色质、腺细胞和神经细胞内的粗面内质网及透明软骨基质等均被碱性染料染色。
2)嗜酸型
组织细胞内碱性物质与酸性染料(如伊红)有亲和性，染色结果为红色。细胞质中的蛋白质如红细胞中的血红蛋白、嗜酸粒细胞的颗粒及胶原纤维和肌纤维等被酸性染料染色，这些物质称为嗜酸型。
2、苏木精&伊红
1)苏木精
由苏木中提取的一种酚类化合物。是细胞学中常用的染色剂，常与伊红合用。难溶于冷水和乙醚，易溶于热水和热乙醇，溶于碱、氨和硼砂的溶液。在分析化学中用于比色分析、显微镜分析，并用作pH值指示剂，变色范围5.0-6.0，由黄色变紫色。
苏木精为碱性染料，将细胞核染为蓝色;在水溶液中，特别是在碱溶液中易被空气氧化成红棕色的氧化苏木精。
2)伊红
伊红是一种化学合成的酸性染料，在水中解离成带负电荷的阴离子，可以和蛋白质氨基上带正电荷的阳离子结合，从而使细胞胞浆染成不同程度的红色或粉红色，与苏木素染色液染色形成的蓝色细胞核形成鲜明对比，从而使苏木素伊红染色成为病理组织切片中最广泛使用的一种常规染色方法。
伊红分水溶性的和醇溶性：水溶性伊红，易溶于水，溶液呈绿色荧光，能溶于醇。组织学用于上皮细胞、肌肉纤维和细胞浆染色。醇溶性伊红，能溶于碱，微溶于乙醇，不溶于水。吸附指示剂，检测F离子，定量分析滴定溴离子和碘离子。 #干货分享##实验技巧 #HE染色# #HE#