如何拟合Elisa标准曲线

病理医师

酶联免疫吸附实验(ELISA)可用于检测大分子抗原和特异性抗体等，具有快速、灵敏、简便、载体易于标准化等优点，广泛应用于生物医学实验中。今天和大家分享使用Originpro 2018学习版以及ELISACalc软件对Elisa标准曲线进行四参数拟合。

下图是标准品浓度（pg/ml）和酶标仪测得的对应OD值：





方法1 Origin软件绘制Elisa标准曲线

Step1：打开Originpro 2018学习版（Origin其他版本均可），输入数据，X轴为浓度C，Y轴为OD值：



Step2：选中X,Y两列数据



点击Plot，选择2D，Scatter，选择散点：



得到标准的基本图形：



Step3：进行Logistic曲线四参数拟合。点击Analysis，Fitting，Nonlinear Curve Fit,Open Dialog…



进入如下界面：



选择Function，Logistic



在Setting下选择Find X/Y，由此根据测得待测样品的OD值计算待测样品的浓度。选择Find X from Y，即由OD值计算浓度。





点击Fit，得到拟合曲线以及拟合公式，R2：


Step4：根据待测样品的OD计算浓度。在Book1下可以看见FitNLCurve，输入Y value（OD值）即可算出X Value。





方法2ELISACalc绘制Elisa标准曲线

Step1：打开软件，输入数据：



Step2：回归/拟合 模型（M），下拉选择Logistic曲线拟合2（四参数）



点击回归拟合：



点击回归方程，可以得到拟合方程以及R2等：



点击


可以由待测样品的OD值得到待测样品的浓度。



两种方法均可以方便快捷的得到拟合的标曲并计算待测样品的浓度，希望对大家有帮助。
来源：解螺旋·临床医生科研成长平台

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