Western blot过程中，如果洗膜不充分，会怎样呢？

非诚勿扰孟非

素材来自医院的一位客户朋友
她每次WB结束，满心欢喜的等待曝光结果的时候，结果都会让她内心蒙上阴影。条带其实都蛮好的，趋势也是自己想要的，但是整个膜都会灰灰的，有的是直接很黑导致无法看到自己的目的蛋白条带。我们看下她的实验结果图



多张WB结果都是这样，内参也是，膜灰灰脏脏的（什么原因呀）

我们在交流的过程中，排除了很多影响因素，最后发现出在一个很简单的操作上，就是洗膜的时间上，当她告诉我洗膜时间的时候，我也惊讶了，共洗膜3次，每次3min。最后就建议她更改洗膜时间，还是3次，每次10min。结果就变得比较完美了，内参一点背景都没有了，目的条带变得都清晰了很多



调整洗膜时间后拍摄



调整洗膜时间后拍摄

所以在wb的过程中，洗膜是不能偷懒的，否则又要重做了。

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