磁珠法提取核酸是为什么不把蛋白酶K直接添加到磁珠溶液中，而需要在提取样本的时候单独加蛋白酶K?

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磁珠法提取核酸是为什么不把蛋白酶K直接添加到磁珠溶液中，而需要在提取样本的时候单独加蛋白酶K?
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清风寡欲

网上搜索可知：
       蛋白酶K具有2个Ca2+结合位点，用乙二胺四乙酸螯合蛋白酶K中的Ca2+，处理3h其活性降低50%，而加入Ca2+复性处理，其酶活只有初始酶活的28%。蛋白酶K对尿素具有较强的耐受性，低浓度SDS对其活性影响较低，高浓度影响较大，PMSF对其活性具较强的抑制作用。
       综合磁珠法裂解液的下述成分，临时加蛋白酶K，裂解液成分对蛋白酶K的活性受影响不大，毕竟裂解步骤就几分钟；如果试剂分装时就加入，蛋白酶K活性就无法保证了。

磁珠法核酸提取试剂常见成分及作用：
1、SDS（十二烷基硫酸钠）
  SDS是一种阴离子表面活性剂，能够使分子间和分子内的氢键断裂，使得分子去折叠，破坏蛋白分子的二、三结构，使得蛋白质变性。在高温环境下，其能够破坏蛋白质与核酸的结合，促进核酸释放。
2、聚乙二醇辛基苯基醚（Triton X-100--曲拉通）
  这是一种非离子表面活性剂，其在水中不易解离，在溶液中稳定性也很高，不容易受到强电解质无机盐类的影响。其作用是与生物膜中的磷脂等脂质结合形成可溶性复合物；疏水端也能与膜蛋白的疏水区结合形成复合物，溶解于溶液中。
3、异硫氰酸胍（GITC）
  异硫氰酸胍是强有力的蛋白质变性剂，它能够迅速地将蛋白质溶解，使得细胞结构破碎，核蛋白由于其二级结构的破坏消失而迅速地与核酸分离开来。其也是RNA提取试剂TRIZOL的主要成分。
4、乙二胺四乙酸（EDTA）
  乙二胺四乙酸是钙、镁离子螯合剂，它能够抑制脱氧核糖核酸酶对DNA的降解作用（DNase作用时需要一定的金属离子作辅基）。
5、三羟甲基氨基甲烷（Tris-Hcl）
  三羟甲基氨基甲烷(Tris)溶液与盐酸混匀后形成的缓冲剂，为裂解液及核酸提供一个比较适宜的环境。
6、蛋白酶K（Protein K）
  蛋白酶K是由白色念珠菌分离出来的一种强力蛋白溶解酶，它有着比较高的比活性，是核酸提取的关键试剂。其主要作用是将与核酸结合的组蛋白酶解，使得核酸能够游离在溶液中。