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[分享] 核酸检测管里的红色液体是什么?为啥是红色的?

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发表于 2024-10-22 13:49 | 显示全部楼层 |阅读模式
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发表于 2024-10-22 13:49 | 显示全部楼层
不同品牌不一样,不过主流品牌都差不多。
非灭活型是Hanks保存液
灭活型的是tris-hcl,额外含有裂解病毒用的异硫氰酸胍。
还会含有rna酶抑制剂、抗生素之类,红色是酚红。
不含TRIZOL,苯酚毒性太大,不敢用也用不起。
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发表于 2024-10-22 13:50 | 显示全部楼层
核酸采样,顾名思义就是采集生物样本(如鼻/口咽拭子)的核酸,然后通过PCR技术进行扩增,检测是否存在目标序列,从而判断某一物种是否存在。新冠疫情发生以来,这项技术逐渐为大众所熟知。
那么采集生物样本,以至于后面还要检测其中的核酸成分,就要保证采集样本中的核酸不被分解。但生物样本中的活细菌、脱落细胞和其他分泌成分中都可能存在催化核酸裂解的活性成分。尤其是新冠病毒遗传物质为RNA,其稳定性比DNA更弱,所以更容易被裂解。
所以采样管里的保存液就只有一个使命——让检测样本中的RNA被妥善保存。
最简单的办法就是让生物样本中“寸草不生”,即杀灭一切脱落细胞和细菌并抑制所有潜在的RNA水解酶。比如,我们可以用高浓度的表面活性剂破坏细菌、细胞的膜结构,然后用高浓度的胍盐(一般是异硫氰酸胍)抑制其中的酶,这就很类似于医学实验中常用的TRIzol试剂:



Trizol本身就有红色



异硫氰酸胍

这种不管病毒死活的保存液成为灭活型。
还有一种方案,就是让生物样本中的病毒活下来,因为病毒的薄膜和衣壳结构能够保护RNA,使之不被裂解。所以相对的,这种保存液就叫非灭活型


这种保存液就需要足够温和,而且有一定的营养成分,同时还要有高浓度抗生素,抑制其中的细菌繁殖。因为细菌可以分解病毒的蛋白质和核酸。所以这种核酸保存液的主要成分是基础培养基(如基础Hanks液)、庆大霉素、抗真菌剂、牛血清、冷冻保护剂、生物缓冲剂等。其中的培养基就含有酚红试剂,这是一种酸碱指示剂,其在中性时为红色,酸性时为黄色,碱性时为紫色。如果培养液发生细菌污染,液体pH值下降,就会显示出黄色。
灭活型可以保证杀灭病毒,所以检测人员即使不小心沾染也不会感染,而且这种保存液对保存环境要求很低,常温或者4℃冷藏就足够了,甚至如果工作量大,一时检测不完,保存几天还能测。
相比之下,非灭活型里面有活病毒,检测人员要高度重视自我防护,否则可能感染。同时,为了有效保存活病毒,需要冷链运输,保持冷冻状态,运输成本高。不过,因为可以保存活病毒,所以可供培养和扩增病毒用,以供诸如研发疫苗或其他医学研究用。
回到问题,题主拿的管子可以常温取用,结合目前常态化核酸筛查的需求,并不需要保存活病毒,所以应该判断是灭活型保存液,里面是Trizol试剂。


友情提示:其中的苯酚成分有毒,如有破损,请注意通风、离开污染环境,避免吸入。
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发表于 2024-10-22 13:51 | 显示全部楼层

它是一种样本保护液。基础液是改良的核酸提取裂解液,主要成分有抑制RNase的RNA酶抑制剂即钒氧核糖核苷复合物、焦碳酸二乙酯等,以及EDTA、Tris、盐酸胍/异硫氰酸胍等。它们可以裂解蛋白,保护并释放出核酸。起主要作用的是抑制剂,它能保护mRNA的完整,有利于提高转录及翻译的效率,同时避免了使用有机化合物抑制剂可能带来的影响。然后经过PCR扩增,检测是否有特征核酸片段。
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新冠核酸检测的采样管分灭活型和非灭活型两种类型。

灭活型保存液,它属于病毒裂解型保存液,基础液是改良的核酸提取裂解液,成分有胍盐,Rnase抑制剂。常温保存即可。
它的优点是:
1、节省了病毒样品保存以及运输的成本。
2、内含高浓度的胍盐即可高效灭活病毒,能有效阻止新冠核酸快速检测操作员二次感染。
3、能在常温下保存相对较长的时间,节省了病毒样品保存以及运输的成本。

非灭活型保存液,它属于病毒维持液型保存液。基础液是运送培养基为基础改良液,成分是Hanks液基础,庆大霉素,真菌抗生素,BSA (V) ,冷冻保护剂、生物缓冲剂及氨基酸等。它必须严格低温。
优点是:
1、保持病毒在体外的活性以及抗原和核酸的完整性。
2、除了用于新冠核酸快速检测外,还能用于病毒的培养、分离以及抗原的检测。
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发表于 2024-10-22 13:52 | 显示全部楼层

新冠核酸检测的采样管分灭活型和非灭活型两种类型。
灭活型保存液,它属于病毒裂解型保存液,基础液是改良的核酸提取裂解液,成分有胍盐,Rnase抑制剂。常温保存即可。
  它的优点是:

  1)节省了病毒样品保存以及运输的成本。

  2)内含高浓度的胍盐即可高效灭活病毒,能有效阻止新冠核酸快速检测操作员二次感染。
  3)能在常温下保存相对较长的时间,节省了病毒样品保存以及运输的成本。

非灭活型保存液,它属于病毒维持液型保存液。基础液是运送培养基为基础改良液,成分是Hanks液基础,庆大霉素,真菌抗生素,BSA (V) ,冷冻保护剂、生物缓冲剂及氨基酸等。它必须严格低温。
优点是:

  1)保持病毒在体外的活性以及抗原和核酸的完整性。
  2)除了用于新冠核酸快速检测外,还能用于病毒的培养、分离以及抗原的检测。

在试管上贴有标签,有显示有效时间,之前出现过打印出错。


还有条形码,条形码必须和上面标号一致,
有时候,我们采样核酸之后,长时间没结果,
很大可能是因为扫码出的数据和标号数字不对应。
所以,对于试管而言,上面的信息也非常重要。
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发表于 2024-10-22 13:52 | 显示全部楼层
样本保存液,为了让病毒留在溶液中,便于检测的。一开始并没有颜色。

武汉爆发疫情那时候,样本保存液就是普通的生理盐水。送过来的病毒是活的,对我们检验科的人来说增加不少风险。
采样人员,只是叫病人张嘴“啊”几秒钟完事。但是送到检验科后,我们开盖,加样,洗脱,扩增等等,直到最后丢掉垃圾,任何一个环节,都跟活病毒零距离接触。而且经常盖子没盖紧,送过来的时候漏液,漏到袋子里到处都是,一打开手套和桌子上都粘满了。
我们医院不是定点医院,其实很少检测到病毒阳性。即便如此,给我们实验室打扫卫生的大叔不仅不帮我们打扫,跟室长吵了好几次说我们全身带毒。我们做完检测了,只能自己打扫。其他科同事见到我们都躲躲闪闪的,总觉得只要检测了一个阳性,整个检测核酸的人员,全身可能都带着病毒。

两个月后,保存液改进。里面添加了灭活病毒的成份。送来的管中,病毒是灭活的,就算可能小管壁沾上几只活的,起码也没有之前那么危险了。

然后,解决了一个问题,下一个问题又来了。因为我们加样板是透明的,里面洗脱液等等也是透明的液体。你想想,一整天高强度工作,加上穿那套装备,透气性又不好,全身汗济济,脑袋晕晕的,面对的是密密麻麻装着透明液体的小孔,很难完全不出错。我们实验室,几乎每周都会有几次加错孔的,一加错,整块96孔板的试剂都废了,前面加的也只能重新加样。又浪费时间又浪费试剂。有时候都检测完了,没有出质控线才知道这块板哪里加错了。我想其他检测室肯定也有同样的问题。
好在那段时间,仪器和试剂厂商非常积极。那段时间,试剂厂商利润可观,可能他们提供一家三甲医院的检测试剂月收入都在几十万,一个市一次大筛查就能上千万。因为厂商也不是一家,他们会尽可能抢占市场,几乎每周都会派人来医院问下,看我们检测技术有什么可以改进的地方。
我们就说能不能在保存液中加入色素,这样加到哪了,一眼就能看出。即使加错了也会马上发现。
距离我们反应问题仅仅过了一周,加色素的保存液就送过来了。刚开始保存液都是淡黄色。
后面就有了赤橙黄绿青蓝紫,各种颜色的保存液。可以用来区分,混检,单采采样方式不同,发热门诊,急诊等科室不同。
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