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[分享] 用DAPI染核,在荧光显微镜下看到的细胞核不是实心的完整细胞核,而是下面这种空心的细胞核,请问为什么?

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发表于 2024-10-20 17:29 | 显示全部楼层 |阅读模式
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发表于 2024-10-20 17:29 | 显示全部楼层
做免疫荧光染过很多细胞株和组织,你这种情况倒是从未见过。
不过有些情况可能会和你类似,但不妨碍结果。比如,会看到有些蓝色细胞核有隐隐暗区,那个应该是不同细胞系dna分布方式造成的问题,毕竟dapi是跟dna结合,dna多的地方,自然就亮。比如以下图本人曾经染过的两种不同细胞为例,细胞核差异很大,上面的细胞核相对均匀,下半部分的细胞核有很明显的暗区,但这并不影响结果。



然而,暗区即便再大,应该也不会出现像你说的空心细胞核。当然,由于看不到你的图片,所以推测也许是细胞差异的问题,只要不是技术问题,这不会影响你的结果。其次,也不排除是实验方法的问题以致染色出现问题。在看不到你的图片情况下,一切都很难说。
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发表于 2024-10-20 17:30 | 显示全部楼层
可以给你一个简单的引子自己去思考并且查阅一下相关课本就可以解决这个问题:
因为DAPI结合的是DNA,他结合的并不是细胞核
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发表于 2024-10-20 17:31 | 显示全部楼层
刚好之前拍过免疫荧光(IF)!!!
首先告诉你,老哥你拍的完全没有任何问题!!!如果没有拍出你这个的其实拍得就不好了
在细胞核用DAPI染过之后,在免疫荧光下出现类似于月亮的图像(月亮仔细看也有阴影),这是非常正常的,因为你的DAPI无法染核仁,所以空心的就是核仁!
有的时候拍的没有空心,那很有可能是过曝了或者说你自己调色的不好。
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发表于 2024-10-20 17:32 | 显示全部楼层
虽然没有看到图,但是盲猜是核仁。
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发表于 2024-10-20 17:33 | 显示全部楼层
你把荧光显微镜拍的照片贴出来,你确定定位在细胞核吗,内质网结构在显微镜下看到的是空心的圆圈圈结构。
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