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[分享] 大家如何看待国产ELISA试剂盒?

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发表于 2024-10-5 22:15 | 显示全部楼层 |阅读模式
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发表于 2024-10-5 22:16 | 显示全部楼层
现在很多行业都在说国产替代,但是在科研试剂,尤其是试剂盒这方面,好像进程还比较慢。
归根结底,是前些年,某些国产Elisa试剂盒坑了科研者的实验,而且概率挺大,生物科研又是师兄带师弟这种模式,代代相传,就大家都不愿意冒险去用国产试剂盒了的了。
那是不是国产Elisa试剂盒就没机会了?也不是,只要有人用过发过文献,实际验证过,那就可以认为是可靠的。进口试剂盒刚出来也不能就确定是好用的呀,也是需要有人用过,文献中引用过,才会与更多的人使用。
那怎么去找别人文献中用过的国产Elisa试剂盒呢?
推荐一个科研试剂信息查询数据库(Elisa试剂盒,抗体,酶,生化试剂,细胞等):
AI-Driven BioMed R&D Solution (deepbiogroup.com)(推荐电脑查看)
或者直接搜索“DeepBio Group”,点击第一个就是。
这个面向科研人员免费的数据库收录了市面上各家厂商的所有种类的科研产品信息,包括抗体,酶,蛋白,细胞,耗材等等,当然还有Elisa 试剂盒。不仅有基本信息,如货号,规格,靶标,种属,反应性等,还直接提供文献引用信息,即这个试剂被哪些文献引用过,都会直接展示出来。
这样,当我们想选某一个国产Elisa试剂盒的时候,就可以在这个数据库里查一查,看看有没有人使用过,是否靠谱。
下面用 VEGF Elisa试剂盒演示一下:
1、首页搜索试剂盒名称,选择免疫检测


2、展示市面上所有品牌的Elisa试剂盒,同时可以在页面左侧进行试剂盒属性的筛选




3、左侧可以选择你想要的品牌


4、可以查看具体试剂盒的引用数据,点击题目可以直接链接原文


5、可以直接查看引用文献的figure




<hr/>你想找的国产Elisa试剂盒是否好用,根据这个数据库,就可以一目了然了。
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发表于 2024-10-5 22:17 | 显示全部楼层
ELISA试剂盒选择要素:
1. 根据实验物种及待检样品性质来选择
种属:人、小鼠、大鼠、鸡、牛、猴等;
样本类型:血清、血浆、组织培养上清、组织或细胞裂解物。
2. 根据样品中检测物水平选择
宽动力学检测范围:对样品种待测物水平没有任何参考数据;
高灵敏度试剂盒:待检物含量很低。
3. 根据样本可获得性来选择
通常商品化试剂盒的样品用量在50ul或100ul,也有部分用量可以少至20ul。
4. 供应商资质评估
同行口碑、文献引用、品牌历史。
5. 试剂盒关键技术参数
加标回收率、精密度、灵敏度等。


传说中的八大质控指标
规范严格的ELISA厂商会对产品进行质控,联科生物每个指标的ELISA产品说明书都会标注八大质控数据。一起来了解下这些指标的含义~


规范严格的ELISA厂商会对产品进行质控,联科生物每个指标的ELISA产品说明书都会标注八大质控数据。一起来了解下这些指标的含义~
1. 回收率:将已知的低、中、高浓度的重组蛋白掺入到待测样本中,掺入前后测到的浓度增加部分与掺入浓度之比就是回收率,以此验证检测的准确度。复杂的样本基质,如血清、血浆中可能含有干扰因子,影响准确定量目标分析物。优秀的ELISA试剂盒回收率通常在80-120%之间(视为无可计量的基质干扰),合格试剂盒在60%左右。
2. 稀释线性:样本稀释后,最终分析物浓度应该相同,这个就是公认的实验线性。干扰因子会影响实验的线性,除非在研发环节克服这些干扰效应。我们为每个验证过的样本类型用试剂自带的稀释液进行系列稀释。结果用检测值和理论值的百分比表示,线性介于80-120%为理想结果。
3. 精密度:在相同条件下,对被测量物(高、中、低浓度)进行多次反复测量,测得值之间的一致(符合)程度。这一特性具有重要意义:1)保证一项试验中得到的结果是准确的,并且一次实验到下一次实验结果可重复;2)判定两个结果相同还是不同。通常用变异系数(coefficient of variation, CV)来表示。优秀ELISA试剂盒的酶标板内变异系数(CV)小于5%,酶标板间变异系数小于8%
4. 校准:每个试剂盒包含的标准品都经过高纯度蛋白的校准。联科生物标准品质量是通过与母校准品进行比较而制定。用于保证不同批次间试剂盒的一致性,所有批次的试剂盒均经过母校准品校对,不会出现结果偏差。
5. 特异性:抗体是特异的,只与相应抗原反应。实际制备的抗体却常有非特异性反应,这是因为抗原不纯造成的。多组分抗原之间存在共同的抗原决定簇,或者两个抗原决定簇结构类似能与同一抗体结合,均可出现抗体与异源抗原的交叉反应。

ELISA试剂盒包含的试剂




以双抗夹心法中的二步法ELISA试剂盒为例:
ELISA试剂盒一般包含说明书,封板膜,预包被的酶标板,标准品,生物素被标记的检测抗体,链霉亲和素标记的HRP,显色液,终止液,检测缓冲液,标准品稀释液,洗液等十个组分。
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发表于 2024-10-5 22:17 | 显示全部楼层
在本文中介绍了一些快速挑选高品质ELISA试剂盒的标准,有需要的可以看一看。
义翘神州:如何快速挑选高品质ELISA试剂盒产品
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发表于 2024-10-5 22:18 | 显示全部楼层
刚认识了一个thermofisher, promega区域总代。
(我做基因方面,其实蛋白做的很少)
这个代理特地告诉我,如果万一有一天做elisa,千万别买国产的elisa盒子,良莠不齐,失败率太高,当然价格方面有很多优势。
比起实验失败、各种找error原因、浪费大量时间,我宁可要进口盒子多花些钱,一次性把实验做好。

国产厂家不反思其为利降低产品质量,不拿出工匠精神精雕细琢,路会越走越死的。
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发表于 2024-10-5 22:18 | 显示全部楼层
现在国产的Elisa试剂盒质量良莠不齐,国产中我用过的Elabscience(伊莱瑞特)的、Cusbio(华美)的质量还是蛮好的,用过几次,重复性都比较高。
在这里特别要鄙视那些无良的Elisa试剂盒造价商,你们坑了我们的钱,最重要的坑了我们的时间和精力!引用一篇文章表达我的愤怒!
近期的实验有部分要用到ELISA盒子来定量,下面两个研一的师弟师妹跟着我一起出论文,无独有偶全部选择了ELISA做指标。之所以这样,无非是因为那些生物公司给出的价格确实很诱人:一个常规的指标,48T的盒子,代购+代测总共800圆,呵呵,很有吸引力啊!对于那些取完材就想当甩手掌柜,只拿数据来造文章的人来说,确实是貌似不错的一个选择。期间他们通过那个生物公司做了某个指标的测试,呵呵,连通道都没搞清楚,做出来的数据更是天壤之别...
我觉得挺奇怪,就用纯水做了个检测,居然也能度出数来,呵呵!想想也难怪,进口的盒子动不动就要五六千大洋,中国造就算是便宜,又怎么会到这么离谱的程度呢?而且国内究竟有没有做一抗、二抗的能力,我看也是两说吧。说起来对于我们这些做实验的人来说,国际造和中国造的抉择真的是一个两难的问题,要么选择高的投入从而保证实验的可重复性和可靠性,要么就选择低投入低回报:花钱换回一堆不可靠的甚至是造假的数据。科研的经费本来就已经很紧张,如果国内的ELISA市场能够真正规范起来,不用再担心他们的可靠性和可信性,国人肯定会有部分选择使用国产试剂盒,同时国外期刊的审稿人也会逐渐认可使用中国造试剂盒所得出的结论,最终产生的就会是一个良性的循环:做实验的人不用再担心经济压力、实验结果的可靠性与可重复性;审稿人也不用纠结于我们使用了中国产试剂盒所得出的结论是否真实、可靠。但事实偏偏与此相反,我们根本无从判断自己所预定的试剂盒质量如何,只能花钱、浪费样本来进行本不需要的“预实验”。除了纯粹的中国造之外,也还有贴了标的分装货,你们不是喜欢看牌子吗?原装货价格贵吧,你舍不得买吧?那我就给你卖进口分装的,美国R&D的、瑞典Mercodia的,你想要什么牌子的就给你什么牌子的,只要一个电话北京、上海一周内就能到货,呵呵。这对像我们这样没什么钱买耗材、试剂的小博小硕们无疑是一个挺好的安慰,心里还会想着不是国产货,都是进口分装的。其实实际上只要是入行的人心里都明镜似的,那些东西谁来给你分装啊?那不是砸自己招牌....
如今之道,还是贴钱买进口的盒子吧!
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PS:今天听一个懂行的朋友说,那些假试剂盒多半都是用了VEGF,因为它在绝大多数的各种生物组织内都会有表达的...不过我用的超纯水中难道也有么?奇怪了...
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