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[分享] 细胞免疫荧光很脏怎么办?

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发表于 2024-9-29 20:44 | 显示全部楼层 |阅读模式

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荧光表现:细胞核以外任何视野的DAPI阳性(点状或片状,沿细胞形态)
警惕支原体感染!

细胞支原体感染很烦:肉眼不可见,不影响细胞生长,培养基不变色,但是可能影响细胞生物学功能,导致实验结果不可信

错误的检测法:支原体检测试剂盒或PCR,贵且慢,敏感度差
正确的检测法:细胞种在coverslip上,4%PFA固定后直接染DAPI,细胞核以外任何视野的DAPI阳性(点状或片状,沿细胞形态)都是支原体感染。便宜,速度快,特异度和敏感度高。说什么破碎细胞DNA导致的DAPI阳性都是胡扯。

错误的解法:支原体清除剂Plasmocin,贵,需处理7天,同样杀死正常细胞
正确的解法:从临床角度出发,喹诺酮类药物可以治疗支原体感染。所以,去药店买左氧氟沙星,用灭菌PBS在超净台配成50mg/ml(注意,左氧氟沙星在这个浓度下为混悬液,加入培养基前要摇匀),1比10000加入培养基里面,培养24-48h,换回正常培养基做免疫荧光。

原文地址:https://zhuanlan.zhihu.com/p/720217010
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