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[分享] 【Western-Blotting#历史】谁发明了Western-Blotting?

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发表于 2024-9-27 06:21 | 显示全部楼层 |阅读模式

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在Western-Blotting的发明史上,有三个团队参与的Western-Blotting的发明,分别是西雅图Fred Hutchinson的Neal Burnette,瑞士的Harry Towbin和斯坦福大学的George Stark。
Western-Blotting(WB),又叫蛋白印迹(Protein Blotting),1979年是WB发明史上最重要的一年。很多人知道蛋白印迹发明源自核酸印迹:1975年,英国Edinburgh大学的Edwin Southern发明了Southern Blotting,用于DNA片段的分离、检测;1977年,George Stark团队发明了Northern Blotting,用于RNA片段的分离、检测。二者都是通过琼脂凝胶将DNA或RNA分离后,转染至特定的膜(硝酸纤维素膜)上,再采用特定的探针检测特定核酸分子的含量——WB的原理也是如此。
1979年,George Stark团队在美国科学院院刊(Proc Natl Acad Sci U S A. 1979 Jul; 76(7): 3116–3120.)(1979年4月提交论文)发表文章声称发明了一种可以用于抗体特异性和抗原结构研究的方法,文中显示可以用类似核酸印迹的方法检测分离、检测碘-125(I-125)标记的蛋白A;同时文章还显示可以DBM膜上的蛋白A和抗体可以被尿素(urea )和2-二巯基乙醇(2-mercaptoethanol),同时同一膜可以再次被检测——抗体洗脱(stripping)也是采用相似的原理。
同一年,Harry Towbin团队则应用现在众所周知的被广泛应用的蛋白电泳转移原理和方法,包括SDS-PAGE电泳凝胶、硝化纤维膜(NC膜)、“三明治”转膜、荧光或过氧化氢酶标记的二抗应用及免疫放射自显影术(autoradiography)的方法检测蛋白。这一方法的发明,使得研究者可以通过应用特定的免疫学反应检测更广泛的蛋白,文章也发表在美国科学院院刊(Proc Natl Acad Sci U S A. 1979 Sep; 76(9): 4350–4354)(文章提交予1979年6月)。
来自美国西海岸的的Neal Burnette也在1979年提交了WB的相关成果,尽管他独立的完成了相关技术的开发,但由于George Stark和Harry Towbin的文章发表更早,而Neal Burnette的工作较前二者又无明显创新性贡献,相关成果无奈被拒稿。有趣的是,在这一文章中,Neal Burnette给这一技术取了个响当当的名字——“Western Blotting”,当然这也归功于Neal Burnette对这一技术和名字的广泛推广。经过几经波折,他的成果终于在1981年发表在Anal Biochem杂志(Anal Biochem,112 (2), 195-203 Apr 1981)。
由此可知,George Stark团队是最早发明蛋白印迹的方法,Harry Towbin发明的蛋白印迹方法应用最广,而Neal Burnette贡献蛋白印迹的命名权。对于谁发明了这一技术,目前学界仍有争论,然而随后的蛋白印迹相关的研究论文多引用Harry Towbin和Neal Burnette的文章。
科学界向来注重研究成果的首发权,相信很多人都遇到投稿时文章成果被别的团队抢先发表而被拒稿的困境,而Neal Burnette这样的“不幸中的万幸”恐怕再也难在资讯如此发达的今天复制了。

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原文地址:https://zhuanlan.zhihu.com/p/114368429
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