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[分享] 请问为什么我在家自己尝试培养细菌总是失败呀?

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发表于 2024-9-26 22:29 | 显示全部楼层 |阅读模式

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用培养基na、独立包装的培养皿  自己在家煮了之后放凉了用手或者脏棉签就画了四分之一○,可是效果总是不好没有有颜色的菌落 只有白白的一片一片 ,没画的地方也有菌落,或者边界不明显。如图。。。最近是夏天平均30度左右,请问各位大神这是什么原因?





原文地址:https://www.zhihu.com/question/467809175
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发表于 2024-9-26 22:30 | 显示全部楼层
在家里,可以简易制作一个相对无菌区。
比如。点一圈蜡烛,利用蜡烛燃烧过的空气相对无菌,而且蜡烛燃烧形成的热气流向上走,导致空气自然沉降菌很难落到培养皿上。这样可以有一定的概率不被污染。另外就是操作一定要快。1-2S内完成操作,而且培养皿盖子不能完全揭开,漏一条可以完成操作的缝隙就可以了。这样算是最大程度的避免污染了。
如果想要获得有颜色的菌落,可以考虑用棉签到马桶刮一圈,再涂抹在培养皿上,大肠杆菌的菌落是红色的。
祝你成功。
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发表于 2024-9-26 22:31 | 显示全部楼层
既然都自己动手培养细菌了,有点实验精神自己用对照实验找问题啊。
A排除培养皿培养基灭菌不彻底。
灭菌完之后把组装好的培养基培养皿在你打算培养细菌的环境中静置你打算培养的同样长的时间(自始至终不要开盖)。
出现菌落,则二者或二者之一或组装过程消毒不完全。查阅资料检查流程,改进至A操作后无菌落。
B排除接种过程中空气不洁净,空气中微生物掉落到培养基上。
在你预定的接种环境中开盖你预定的操作时间然后盖上培养。
出现菌落,则空气不洁净需改进。改进至B操作后无菌落。
C排除接种过程中手、衣服等不洁净,操作过程中微生物脱落掉落到培养基上。
在你预定的接种环境中以在培养基上方数毫米虚拟划线的方式模拟实际接种过程,划线完成后盖上培养。
出现菌落,则手、衣服等不洁净需改进。改进至C操作后无菌落。
按顺序一步一步来,一样一样排除改进。ABC操作都无菌落后,可以保证培养基的微生物只来源于接种针。菌落颜色啥的取决于你接种的品种,慢慢采样慢慢找就行。
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发表于 2024-9-26 22:31 | 显示全部楼层
从头开始说,
操作环境,最好在无菌环境操作,自己在家做实验,觉得超净台太贵,可以买个小手套箱,几百块。就算实在没有无菌环境,可以尝试在酒精灯外焰周围操作
材料,你这个没划线部分也有菌,两种可能,培养基灭菌不彻底或者平板不是无菌的。
培养基要灭菌彻底需要121℃灭菌锅20分钟以上。芽孢之类的菌在100℃是杀不死的。
培养环境,培养环境最好气流静止或者较小,否则一些细菌和霉菌孢子也会形成气溶胶进培养基。
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发表于 2024-9-26 22:32 | 显示全部楼层
没涂的地方也有?
灭菌不完全吧
能保证121度20分钟吗?
另外
接种和培养期间要保证无菌
在家做无菌实验真是难为你了
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