一种称为DELFI(DNA evaluation of fragments for early interception)的方法,通过全基因组分析cfDNA片段模式,能够检测大量异常。该方法依赖于低覆盖率的全基因组测序,分析健康和癌症人群中cfDNA片段的覆盖率和大小分布。与健康样本相比,癌症患者显示出多种基因组差异,片段大小在不同区域呈现增加和减少。DELFI可同时分析微量cfDNA中的数十到数百种肿瘤特异性异常,有助于确定cfDNA的来源,并利用临床特征和甲基化变化进一步改进诊断。其所需的全基因组测序量少,显示出在癌症筛查和管理中的广泛应用潜力。
Peter Ulz开发并验证了一种基于cf DNA 测序及核小体足迹分析的微创方法,能够评估转录因子(TF)的活性。作者观察到肿瘤特异性的TF结合位点模式可用于癌症早期诊断和分子分型。基于血液样本在体内绘制肿瘤特异性转录因子结合的方法使非编码基因组的关键部分适合临床分析。由于 TF 在整个基因组中调节基因转录的潜力及其通常精致的谱系特异性,它们基于 cfDNA 的详细无创分析为改进临床诊断提供了独特的机会。
Shen SY 等人开发了一种灵敏的、基于免疫沉淀的方案来分析少量循环游离 DNA 的甲基化组,即开发了甲基化 cfDNA 免疫沉淀和高通量测序 (cfMeDIP-seq),用于全基因组无亚硫酸氢盐血浆 DNA 甲基化分析,并展示了检测富含肿瘤特异性模式的大规模 DNA 甲基化变化的能力。还在来自多种肿瘤类型的大量血浆样本中展示了癌症检测和分类方面的稳健表现。这项工作为建立基于浆细胞游离 DNA 甲基化模式的早期癌症微创检测、拦截和分类生物标志物奠定了基础。
Susana García-Silva等人首次证明渗出性血清肿( exudative seroma ,ES )衍生的 EV 可能代表黑色素瘤进展的有用替代标志物,并且适用于检测黑色素瘤特异性突变。与血浆相比,通过淋巴引流获得的 ES 是一种富含 EV 的生物流体。还发现 ES 衍生的外泌体和黑色素瘤细胞系分泌的外泌体中的蛋白质和通路之间存在显着重叠。此外,在通过淋巴引流获得的 ES 囊泡中检测 BRAF 突变可能是识别可能由于残留病灶而有复发风险的患者的新参数。这些患者随后可以在手术后立即从特定的辅助治疗中受益。
鉴于 EV 封装了反映细胞特异性病理过程的受保护携带物,它们作为循环生物标志物具有巨大潜力,为增强当前的癌症监测、预后和治疗策略提供了一条有前途的途径。这反映在许多采用液滴数字(dd)PCR 和各种测序方法来检测 EV 相关突变 DNA 拷贝的研究中。
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