检测艾滋病，一共有几种办法？

营养师

检测艾滋病，一共有几种办法？
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核酸检测、四代抗原抗体检测，三代抗体检测等等，我具体来说说：

• 目前发展到了几代？
  

如上图所示，目前已经是第四代的检测技术了，
从 1985年出现了第一个商用 HIV筛查试剂起，HIV检测经历了由抗体检测到抗原抗体复合检测的发展历程，
前三代试剂仅检测抗体（第一代、第二代检测HIV-IgG抗体；第三代HIV-IgG 和IgM 抗体），
第四代试剂则在原来的基础上，增加了p24 抗原。
从时间上，第二代比第一代平均缩短了20天左右，而第三代试剂则在三周左右可以检出，第四代试剂的优势在于急性期 p24 抗原的浓度较高，因此感染后 2 周左右可检出。
此外，还有核酸定量、定性检测技术，可以在一周左右检出。
2.初筛检测方法有哪些呢？
酶联免疫吸附试验（ELISA）
原理是利用抗原抗体特异性结合的特性,通过酶催化和放大作用检测样本中是否含有 HIV 抗体和 / 或抗原。
可使用血液（包含血清、血浆和干血斑）、尿液样本，
既可检测 HIV抗体，也可联合检测 HIV 抗体抗原。
特点是：检测周期较长,通常需要1~2h，灵敏度高,但特异性较低，个别存在假阳性的可能性，只能用于筛查，不用于诊断。
化学发光试验（CLIA）
原理是利用发光底物代替酶标底物,通过读取发光值对结果进行判读。
可使用血液(包含血清和血浆)样本，
既可检测抗体，也可联合检测抗体抗原。
特点是试剂灵敏度更高、检测周期更短，自动化程度较高，灵敏度及特异性均较高。
快速检测（RT）
可使用血液、尿液、口腔黏膜渗出液等类型样本，包括检测抗体和同时检测抗体和抗原，操作简便快速，可用于个体自助检测。一般可在 10～30分钟内得出结果。
目前常用的有：免疫层析试验，明胶颗粒凝集试验，免疫渗滤试验。
目前市面上有各种品牌各种类型的检测试纸，有四代的抗原抗原检测，还有三代的抗体检测等。
3.抗体确证试验有哪些？
免疫印迹试验（WB）
WB 可使用血清、血浆和干血斑样本，采用间接法检测样本中的抗 HIV-1/HIV-2特异性抗体。
采用聚丙烯酰胺凝胶电泳把分子量大小不等的 HIV-1 蛋白分离开来，然后再把这些分离的不同蛋白带转移到硝酸纤维素膜上（或 PVDF 膜）。
将此膜切割成条状，每一膜条上均含有经电泳分离过的 HIV 抗原。待测样本经适当稀释后，加至硝酸纤维素膜上，恒温振荡，使其充分接触反应，血清中若含有 HIV 抗体，就会与膜条上抗原带相结合。
重组/线性免疫印迹试验（RIBA/LIA）
可使用血清、血浆和干血斑样本，采用间接法检测样本中的HIV-1/HIV-2 特异性抗体。
试剂盒的膜条上包被有 HIV-1/HIV-2 不同的重组抗原或合成多肽抗原，加入待测样本后，其中的相应抗体与抗原发生特异性的免疫反应，
随后加入酶标记抗人IgG（碱性磷酸酶标记）与 HIV 特异性 IgG 抗体相结合，加入显色底物后，在碱性磷酸酶的催化下，特异性抗体的结合部位出现肉眼可见的条带。
4.检测报告怎么看？
首先是筛查报告，
筛查试验无反应，报告为“HIV 抗体阴性”。
筛查试验有反应，必须进行复检，两次均无反应，报告为“HIV 抗体阴性”，
两次均有反应，或一个有反应一个无反应，还需进一步进行“补充试验”。


再来是补充实验，也就是确证实验，如下图所示：





5.检测的建议：
针对有高危性行为又没有做好安全防护的人群，我一般建议是在窗口期过后去医疗机构做检测，由于实验室有专业人员又有质控措施，结果是准确的。
如果不好意思去医院，想要自己用试制自测，那么一定要按适用的说明书来，不然结果就不准确了。
另外，如果有使用阻断药，那么检测窗口期就得延长，
还有，孕妇检测的话，存在一定的假阳性。
Dr大钟：建议收藏：超全的HIV行为风险评估（wtbdkj+wtzdkj+wtxj+wtgj+ytxj+ytgj+dfj)Dr大钟：建议收藏：再谈HIV急性期症状，具体有哪些呢？

继续前进

艾滋病恐惧症恐友将脱恐的希望全部放在了艾滋病检测上，忽略了心理干预艾滋病恐惧症的重要性，我们认为如果一名艾滋病恐惧症的恐友要彻底脱恐，那么他既需要掌握基础的艾滋病防治知识，也需要了解用心理方法评估自己每一个阶段的状态，学会整合情绪管理的方法。恐艾心理中心的叶老师作为一名艾滋病检验实验室的医师，想介绍一下艾滋病基础防治知识中关于艾滋病抗体检测的一些注意事项，给各位恐艾恐友的心理予以一些支持，祝大家早日脱离恐艾症，回归过往快乐生活。




HIV检测不需要空腹

1、HIV检查需要空腹吗？
不需要空腹。为什么医院抽血会要求空腹呢？那是因为在医院通常还会做其他检查，比如各种酶类，这些项目是要求必须空腹的。只是单纯做一个HIV，是不需要空腹的。
2、HIV检查能喝水吗？
能喝水。
部分恐友可能会问，我喝了水，会不会稀释血液，从而检测不出来。大可不必这样担心，一个正常成年人的血液总量大约是4-5升，少量喝水对血液的稀释作用也不大，况且现在的检测试剂非常灵敏，如果真的感染了，还是能检测出来的。




实验室检测HIV有多种方法

3、HIV检查多久出结果？
酶联免疫法需要大约两到三个小时，如果用快速法或者化学发光法，大约需要30分钟至1个小时。考虑到样本采集和工作安排，各个实验室从收样到出报告时间可能不太一样，通常在1-2天内。
初筛有问题的样本，需要做补充试验，目前大多数医院都属于初筛实验室，因此需要将样本送至确证实验室。按照《全国艾滋病检测技术规范》（2020年修订版）的要求，确证实验室在收到样本后必须5个工作日内出具报告，特殊情况除外。因此加上样本运输时间，通常会在1-2周内收到检测报告。
4、做血常规检测能不能查出艾滋病
叶老师平时做一对一恐艾咨询的时候，常常遇到这样的案例。很多艾滋病恐惧症恐友不敢检查艾滋病，就寻求一些“小聪明”，用血常规检测来代替艾滋病检测，觉得如果一切指数正常那就没有感染艾滋病。但大部分却检测，都发现了一些数值高一些数值低，给自己暗示，增加了恐惧。




一位常年工作在检测一线的女医生

血常规其实并不能检查出艾滋病，血常规的项目主要包括红细胞计数、血红蛋白、红细胞比容、白细胞计数、白细胞分类计数、血小板计数等，并不包括艾滋病病毒抗体抗原检测。即便人体感染了艾滋病病毒，血常规也不会有特异性表现，通过血常规检测无法确定机体是否感染了艾滋病病毒。
虽然在艾滋病病毒最初侵入人体后，部分感染者的血常规会可能出现一些改变，但是这种变化没有特征性，与其他病毒急性感染引起的表现没有任何差别，并不具有诊断意义。比如当人出现病毒性感冒或新冠感染的时候，都会有相似的血常规异常。对于艾滋病恐惧恐友来讲，还是如果没有高危行为，就不应该去纠结艾滋病感染的风险，如果存在高危的风险，那么是必须依靠艾滋病相关检测来进行判断，对于具体的实验室检测方法和特点，叶老师已经在上一篇文章中写明，欢迎查阅。

卡卡

1.HIV血清抗体检测。
最常见的是ELISA法，ELISA又有间接法.双抗原夹心法(直接法)，抗体竞争法，
间接IF法，WB法，胶体金快速检测。
非传统方式检测有唾液中HIV抗体检测，特异度能达到99%以上，灵敏度能达到91%以上。尿液中HIV抗体检测，灵敏度能到达99%，特异度达到99.1%。还有微量滤纸全血收集测定法。
2.HIV抗原抗体检测，就是我们所说的四代检测。
3.分子生物学检测，传统pcr检测法，核酸杂交法。
第一代HIV elisa 试剂采用的是：人工培养的感染了HIV的T淋巴细胞系中的裂解产物，该试剂仅能检测针对HIV-1的IgG抗体，窗口期长达8周之久[1]。
第二代HIV elisa 试剂主要使用基因工程重组/人工合成肽作为抗原，这类抗原纯度较高，采用间接法的原理检测血清标本中的HIV-1/2的IgG抗体[2]。
第三代HIV elisa 试剂采用双抗原夹心原理，可同时检测血清标准中HIV-1/2的IgM和IgG抗体，提高了试剂的特异性和敏感性，此外由于能检测出IgM抗体，可以将窗口期由10周缩短至3-4周。
第四代HIV试剂同时包被HIV抗原和HIV p24抗体，加入样本后再加入酶标记的HIV抗原和HIV p24单克隆抗体，第四代试剂能同时检测血清中的HIV抗原和HIV p24抗体。有文献显示四代试剂平均比三代试剂提早6天，即窗口期缩短至2-3周[3,4]。
第五代HIV试剂是2015年以后出现的新一代检测试剂，伯乐BioPlex 2200 HIV Ag/Ab试剂是首个获FDA批准用于临床的试剂，但是在中国尚未获得CFDA批准，该试剂可以提供hiv-1抗体、HIV-2抗体和p24抗原个字检测结果，有数据显示该试剂敏感性为100%，特异性为99.5%[5]。
参考文献：
[1]Owen S M. Testing for acute HIV infection: implications for treatment as prevention.[J]. Current Opinion in Hiv&Aids, 2012,7(2):125-130
[2]Chappel R J, Wilson K M, Dax E M. Immunoassays for the diagnosis of HIV: meeting future needs by enhancing the quality of testing[J]. Future Microbiol, 2009,4(8):963-982.
[3]Alexander T S. Human Immunodeficiency Virus Diagnostic Testing: 30 Years of Evolution[J].Clin Vaccine Immunol, 2016,23(4):249-253.
[4]Vallefuoco L, Mazzarella C, Portella G. Fourth generation assays for HIV testing[J]. Expert Rev Mol Diagn, 2016,16(7):723-732.
[5]Maud S, Severine D, Constance D, et al.Clinical evaluation of BioPlex 2200 HIV Ag-Ab, an automated screening method providing discrete detection of HIV-1 p24 antigen, HIV-1 antibody, and HIV-2 antibody.[J]. Journal of Clin

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我自己用试纸检测可靠吗？
王医生，你看一下我的检测单上用的是什么方法？
尿检和唾液试纸可靠吗？
我两次检测结果不一样，以哪一次为准呢？

以上问题都是我在接受咨询时被问到的。这篇文章就来系统讲一下，关于艾滋病的各种检测方法。
<hr/>两种实验

按检测流程，分筛查实验（初筛）和确证实验（也叫补充实验）。其中，筛查实验呈阳性的，才需要进一步复检，做确证实验。见下图。


<hr/>筛查实验的几种方法

绝大多数咨询者用到的方法，无论是自测还是医疗机构检测，都属于筛查实验阶段的方法。
方法主要包括快速检测（乳胶法、胶体金、胶体硒）、酶联免疫法、化学发光法。

• 快速检测
  

特点：无需仪器，操作简单。如果咨询者因为嫌麻烦或者羞耻心等原因，不愿意去医疗单位，那么可以从正规去到购买自测。
结果判读：一条杠为阴，两条杠为阳。

• 酶联免疫法
  

原理：抗原抗体特异性结合，再加底物显色。用仪器测吸光度值。
特点：仪器检测，灵敏度更高。
结果判读：比值小于1为阴性，比值大于1为阳性。

• 化学发光法
  

原理：抗原抗体特异性结合，再加荧光标记的底物，测发光值。
特点：仪器检测，灵敏度高。
结果判读：比值小于1为阴性，大于1为阳性。
关于筛查实验的几种方法，再强调两点：
1、根据是否能检测p24抗原，试剂（试纸）又分为三代试剂和四代试剂。具体可见之前文章。
HIV检测试剂，三代和四代有什么区别？如何区分？试剂有没有感染风险？2、无论是哪种方法，结果都是可靠的。快速检测（试纸）虽然没有酶联免疫和化学发光的灵敏度高，但也只是相对较低而已。绝大数试纸的灵敏性都在99%以上，结果完全可信。
<hr/>确证实验的检测方法

在2020年之前，确证实验是以检测抗体的免疫印迹法为金标准。在2020年之后，增加了核酸检测，两者都可以作为阳性判定的标准。

• 免疫印迹法
  

原理：将HIV的不同蛋白（抗原）分离开，转移到膜上。血清中抗体和这些抗原结合，加底物显色。
特点：细分抗体，更加谨慎，阳性判定的最终标准。
结果判读：三条或三条以上反应条带（有的试剂是两条）。
具体可见之前文章。
艾滋病确证结果长这样。

• 核酸检测
  

原理：通过PCR扩增，直接检测病毒本身。
特点：因为病毒比抗原抗体出现更早，所以可缩短窗口期。
结果判读：分定性和定量。
具体可见之前文章。
什么情况要做HIV核酸检测？怎么看化验单？关于确证实验，我再强调一点：
绝大多数咨询者初筛都是阴性，所以根本走不到确证实验这一步。需要注意的是，假如初筛是阳性（或者待确定），先不要绝望慌张。因为初筛实验里面，有相当一部分假阳性。最终的结果还是要以确证实验为准。
以上。
<hr/>

继续前进

检测艾滋病的方法有很多种，如果是以检测标志物来区分，可以分为：HIV抗体检测（三代），HIV抗体抗原检测（四代），HIV核酸（RNA/DNA）定性和定量检测。


如果是按照检测技术来分类，简单可以区分为：
酶联免疫吸附试验(ELISA)、化学发光或免疫荧光试验、快速试验(斑点ELISA和斑点免疫胶体金或胶体硒、免疫层析等)、简单试验(明胶颗粒凝集试验)等。抗体确证试验(免疫印迹法，条带/线性免疫试验和快速试验)和HIV核酸试验(定性和定量)。
这些检测方法都是非常准确的，只要过了“窗口期”，检测结果为阴性，即可排除艾滋病感染。


如何诊断艾滋病？
艾滋病感染的诊断原则：
HIV/AIDS的诊断需结合流行病学史(包括不安全性生活史、静脉注射毒品史、输入未经抗HIV抗体检测的血液或血液制品、HIV抗体阳性者所生子女或职业暴露史等)，临床表现和实验室检查等进行综合分析，慎重做出诊断。
成人、青少年及18个月龄以上儿童，符合下列一项者即可诊断：(1)HIV抗体筛查试验阳性和HIV补充试验阳性(抗体补充试验阳性或核酸定性检测阳性或核酸定量>5 000拷贝/mL)；(2)HIV分离试验阳性。
以上~
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