浅谈流式细胞仪—科研小白必备

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流式细胞仪（Flow cytometer，FCM）是对细胞进行自动分析和分选的装置。它可以快速测量、存贮、显示悬浮在液体中的分散细胞的一系列重要的生物物理、生物化学方面的特征参量，并可以根据预选的参量范围把指定的细胞亚群从中分选出来。多数流式细胞计是一种零分辨率的仪器，它只能测量一个细胞的诸如总核酸量，总蛋白量等指标，而不能鉴别和测出某一特定部位的核酸或蛋白的多少。


首先实验菌为大家带来流式细胞仪的基本相关内容：
（1）基本结构
流式细胞仪主要由四部分组成。它们是：流动室和液流系统；激光源和光学系统；光电管和检测系统；计算机和分析系统。
（2）测试样品及其应用
单细胞悬液，可以是血液、悬浮细胞培养液、体液、新鲜实体瘤的单细胞悬液等等；它可以用来分析细胞表面标志、细胞内抗原物质、细胞受体、肿瘤细胞的DNA含量或RNA含量以及免疫细胞的功能等。
（3）相关技术参数
主要的技术参数主要有荧光分辨率、荧光灵敏度、分析速度/分选速度、样品浓度等等。在使用前要进行调试以保证结果的可靠性，调试项目主要有激光强度、液流速度和测量区的光路等。
（4）注意事项
①光电倍增管必须要有稳定的工作条件，另外注意磁屏蔽；
②光源必须预热并注意冷却系统是否正常工作，不得在短时间内重复开关；
③贴壁细胞需要先用胰酶消化收集后进行离心、洗涤、封闭后标记荧光素偶联抗体；
④鞘流液使用前要经过过滤、消毒；
⑤条件允许的话最好封闭样品以免造成非特异性结合的发生；
⑥可以根据检测目标细胞体积的大小适当提高或降低电压值，使所有细胞在流式图中显示完全；
⑦合理的设置实验对照是成功的关键，如生物学对照、空白对照、同型对照等等；
⑧荧光抗体和荧光抗体染色后须避光保存以免发生无染色或者弱染色情况。当然，数据过度补偿也可能会导致这种情况发生；
⑨为了避免染色异常，应使用同型对照相同浓度，最好来自同一厂家生产的同型对照；
⑩抗体浓度不宜过高，染色时间不宜过长可能会导致非特异性染色或者高背景，增加染色后的洗涤次数可改善；


随着免疫疗法的蓬勃发展，流式细胞技术的使用也越来越广泛。流式抗体的丰富性和数据的直观性使其为实验和文章数据增分添彩。不过由于流式细胞仪的价格相对昂贵动辄上百万一台，对于测试不方便且有需求的小伙伴可以将科学指南针平台作为备选，有测试“困难”就找科学指南针（不小心打了个广告O(∩_∩)O）~


以上就是本期关于流式细胞仪的相关基本信息和注意事项，因流式细胞的相关信息过于庞大难免有疏漏部分，以上内容如有错误欢迎大家留言指正，有需要的内容大家也可以留言小编会努力整理喔~

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