金桔
金币
威望
贡献
回帖0
精华
在线时间 小时
|
细胞培养(cell culture)是指从动物体内取出细胞或者组织,模拟体内的生理环境,在无菌、适温和丰富的营养条件下,使离体细胞或者组织生存、生长并维持结构和功能的一门技术。
接下来为大家介绍几种基础细胞培养基的区别
MEM-Minimum Essential Medium
•添加了营养物的极限必需培养基,也称最低必需培养基、最小基本培养基或低限量Eagle培养基,仅含有12种必需氨基酸、谷氨酰胺和8种维生素。由Harry Eagle在Eagle基本培养基(BEM)的基础上发展而来。在添加血清后,MEM可用于培养多种单层生长的细胞,如成纤维细胞。
•MEM(含NEAA)是在MEM培养基的基础上添加L-丙氨酸、L-谷氨酸、L-天门冬酰胺、L-天门冬氨酸、L-脯氨酸、L-丝氨酸和甘氨酸7种NEAA,能降低细胞培养时细胞自身生产非必需氨基酸的副作用,有效促进细胞增殖代谢。
•α-MEM在MEM的基础上又添加了NEAA、丙酮酸钠、硫酸锌、VB12、生物素、抗坏血酸等成分。
DMEM-Dulbecco’s Modification of Eagle’s Medium
•一种广泛使用的基础培养基,适用于多种哺乳动物细胞培养,包括原代成纤维细胞,神经元,神经胶质细胞,HUVEC和平滑肌细胞,以及HeLa,293,Cos-7和PC-12等细胞系。
•与MEM培养基相比,氨基酸的含量增加了2倍,维生素增加了4倍,同时还增加了非必需氨基酸、微量铁离子以及丙酮酸钠。
•最初设计为葡萄糖含量1000mg/L的低糖型,后来又发展出葡萄糖含量为4500mg/L的高糖型。
•DMEM高糖型普遍应用于生长快、粘附性低的细胞、杂交瘤细胞、克隆细胞、DNA转染的转化细胞、原代病毒宿主细胞、单一细胞的培养以及疫苗的生产。
•DMEM低糖培养基更适合代谢作用较慢、依赖性贴壁细胞的培养。
RPMI 1640-Roswell Park Memorial Institute 1640
•以研发地点罗斯韦尔公园纪念研究所(Roswell Park Memorial Institute. RPMI)命名,1640为培养基代号。
•最初开发用于人白血病细胞的悬浮或单层培养,后来被发现也适用于多种哺乳动物细胞,包括Jurkat、MCF-7、PBMC、星形胶质细胞和多种癌细胞,尤其适用于悬浮细胞的培养,是使用最为广泛的培养基之一。
•与其它培养基的区别在于含有还原型谷胱甘肽和高浓度的维生素。含有MEM和DMEM中没有的生物素、维生素B12和对氨基苯甲酸,以及高浓度的氯化胆碱和肌醇。
Ham's F-12-Ham's F-12 Nutrient Mixture
•由 Ham 在 1969 年以Ham's F-10 复合营养培养基为基础设计而成,最初用于 CHO 细胞的无血清培养。
•含有一些传统基础培养基没有的成分,如腐胺、次黄嘌呤、胸苷、锌等,常作为无血清培养的基础培养液,在低血清含量下时,特别适合单细胞培养和克隆化培养,添加血清后也广泛应用于癌细胞和原代细胞的培养,如大鼠肝细胞、大鼠前列腺上皮细胞、软骨细胞、大鼠成肌细胞、鸡胚胎细胞等。
•Ham's F-12K是Ham's F-12的Kaighn's改进型,在Ham's F-12的基础上提高了氨基酸和丙酮酸的浓度,降低了葡萄糖的用量,并修改了盐的成分和含量。Ham's F-12K培养基最初设计用于培养原代人肝细胞以及分化的大鼠和鸡的细胞,适用于在无血清的条件下CHO细胞的单细胞接种,在添加血清的情况下也适用于一些其他类型的哺乳动物细胞,如软骨细胞和大鼠前列腺上皮细胞。
DMEM/F-12-Dulbecco's Modified Eagle Medium/Nutrient Mixture F-12
•是DMEM培养基和Ham's F-12培养基的1:1混合物,是在DMEM培养基的基础上,添加F-12培养基中更为丰富的营养成分,含有多种微量元素 。
•被广泛用于支持多种哺乳动物细胞的生长,包括MDCK、神经胶质细胞、成纤维细胞、人内皮细胞和大鼠的成纤维细胞等。
•DMEM/F12常作为开发无血清培养基的基础,也适用于低血清含量下哺乳动物细胞的培养以及克隆密度培养,例如培养间充质干细胞,利用CHO细胞表达EPO等。
McCoy's 5A(modified) -McCoy's 5A (modified) Medium
•是一种通用培养基,可支持多种类型的原代细胞、已建立的细胞系以及活检组织中的外植体的繁殖。McCoy's 5A 培养基的原配方用于满足 Novikoff 肝癌细胞的培养需求 。
•McCOY's5A培养基(modified)是由Iwakata和Grace改进而来,这个配方的McCoy's 5A 培养基中含有还原性谷胱甘肽和蛋白胨,肌醇和葡萄糖的含量更高。
•广泛用于多种类型的原代细胞的培养,如骨髓、皮肤、牙龈、肾、脾、肺、大鼠胚胎、网膜等。此外McCoy's 5A培养基还用于组织活检培养,细胞建系,以及一些淋巴细胞和较难培养的细胞的培养。
IMDM-Iscove’s Modified Dulbecco Medium
•是 Guilber 和 Iscove 在 1976 年设计的改良型 DMEM 培养基,用于培养红细胞前体细胞和巨噬细胞。IMDM 培养基在DMEM 培养基的基础上添加了硒、HEPES、丙酮酸钠以及额外的氨基酸和维生素,并用硝酸钾代替了硝酸铁,营养非常丰富,非常适合于快速增殖,高密度细胞培养。
•不仅可以培养有特殊营养要求的细胞(如小鼠 B 淋巴细胞,LPS 刺激的B 细胞,骨髓造血细胞,T 淋巴细胞以及各种杂交瘤细胞),还可以作为一些独特的无血清培养基的基础液。
Leibovitz's L-15-Leibovitz's L-15 Medium
•配方中不含用于CO2平衡环境的碳酸盐缓冲系统,而是用磷酸盐、L-精氨酸、L-组氨酸和 L-半胱氨酸作为缓冲剂。
•同时,用D-半乳糖和丙酮酸钠代替D-葡萄糖以防止酸性代谢副产物乳酸的形成,有助于维持培养基pH的稳定,适合非CO2平衡环境的细胞培养。
•适用于猴肾细胞和HEP-2的培养,来源于胚胎或组织的原代细胞分离,多种病毒的培养以及神经元的培养等。 |
|