WB实验频频失败？可能是抗体保存方法不对

生物科研实验室

WB,免疫荧光等实验用到的抗体一般都比较昂贵，收到抗体后，我们该怎么操作？今天给小伙伴们一起聊下这个问题。

1离心

收到抗体产品，无论是液态还是粉末状，首先应避免直接打开盖子。由于运输过程中可能发生的颠簸和震动，抗体可能已经粘附在容器的侧壁或盖子上。为了确保抗体不会在开盖时散落或飞溅，应将抗体管直接进行离心处理。推荐的离心条件为10,000克（g）力，离心时间不少于20秒。离心过程将帮助将可能分散的抗体成分集中回收到管底，从而便于后续的精确取用。由于抗体液体通常呈透明状，且管壁上附有标签，肉眼可能难以观察到管内液体或粉末的确切位置。离心后，可以更准确地评估抗体的分布情况。

2 分装

分装可以最大程度地降低温度变化对抗体活性的影响，同时也降低了由于多次从同一管中吸取抗体造成污染的可能性。



1. 分装适用于大体积抗体（如50-100 μl）；

2. 分装的量以一次实验用完为好，但最少每份不能少于 10 µl ，分装体积越小，抗体的浓度越可能会受到蒸发以及管壁吸附的影响。

3 保存温度

许多抗体溶液中含有高达50%的甘油，这可以显著降低其冰点，一般认为其冰点约为-23℃。鉴于甘油对冰点的影响，-20℃通常被认为是储存含甘油抗体的适宜温度，可以防止抗体结冰。在-80℃下保存含甘油的抗体可能并不是最佳选择。因为低于冰点的温度可能导至抗体结构发生改变，甚至可能形成无法识别目标抗原的聚集体。由于不同抗体的添加剂组成可能存在差异，它们的保存温度要求也可能不同。为了确保抗体的稳定性和活性，重要的是遵循制造商提供的官方说明书中的保存温度指南。如果考虑长期保存，一些抗体可能需要在更低的温度下保存，如-70℃或液氮中，以保持其最佳性能。对于短期内将使用的抗体，可以在4℃下短期保存，但长期存放仍然推荐使用推荐的低温条件。



4 保存位置

抗体应始终存放在温度稳定的环境中，避免频繁的温度变化，因为温度波动可能会影响其结构和功能。将抗体存放在冰箱的内部区域，而不是门上的架子或容易受到开关门影响的区域。频繁的门开关动作会导至冰箱内部温度的波动，这可能对抗体的稳定性不利。因此，应选择一个相对不易受到这些活动影响的位置。分装后的抗体要记录分装详细信息，并统一放置在固定位置便于管理使用。