焦虑动物模型，行为实验方法

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焦虑症是一种常见精神疾病，以急性焦虑反复发作为特征，主要表现为发作性或持续性的恐惧、担心和焦虑、紧张等情绪反应，并伴有自主神经功能失调、肌肉紧张与运动不安等症状。临床上焦虑症主要分为广泛性焦虑障碍、惊恐障碍、社交焦虑障碍、强迫障碍、特异性恐惧症等类型。在精神障碍中，焦虑症的终身患病率最高，影响到30%的人口的寿命，严重影响人们的生活质量和水平。

常用的大小鼠焦虑行为实验方法可以分为两大类，非条件反射和条件反射。非条件反射包括探究行为、社会行为和防御行为，经典的实验方法包括旷场实验、高架十字迷宫实验、明暗箱实验、孔板实验、新奇环境摄食抑制实验和新奇物体探索实验等。非条件反射试验方法已由上篇文章展开。

条件反射包括饮水冲突、Geller-Seifter冲突等。条件反射的试验方法，本篇文章详细展开条件反射方法。

条件反射实验方法

1、饮水冲突实验

1.1实验方法

实验前将动物禁食48h、禁水24h。分两阶段进行：

（1）非惩罚饮水训练：动物禁水24h后，应单只放入测试箱内，让其充分探究，直到发现瓶嘴并开始舔水，测试时间应为3min，淘汰舔水少于300次的大鼠。

（2）惩罚实验：将动物禁水24h后置于测试箱开始实验。自动物第一次找到瓶嘴并开始舔水后

自动开始计数和计时，动物舔水次数到20次时立即给予1次电击，如此重复循环。测试时间应为3min。

1.2评价指标

舔水次数：惩罚期内大鼠舔吸水管的次数。焦虑模型动物的舔水次数明显减少，抗焦虑药则可增多动物的舔水次数。检测期内，正常动物惩罚期舔水次数为200~400次左右。

2、Geller-Seifter 冲突实验

2.1 实验方法

经典Geller-Seifter程序由变动间期（variable interval，VI）和固定比率（fixed ratio，FR）两部分组成。

（1）训练期：FR1：大鼠禁食24h 后进行压杆训练，训练期为3d，以食丸（45mg）作为奖赏（强化）训练其学会压杆操作，每次压杆都有一次强化（FRI），每天训练30min，连续3d。检测期间限制饮食饮水，使之维持在正常饲养体重的80%，通过限制饮食饮水使动物产生饥渴感，以保持对奖赏物质的驱动力，整个奖赏操作阶段要维持饮食饮水限制。VI-2min：平均每2min的间隔给予大鼠一次奖励物质，每天训练5个周期，每次15min，每天训练总时间为75min。

（2）检测期：非惩罚（VI）期：压杆率较稳定后，则在间期内的每个15min的周期内加入声刺激（3min）。在声刺激期间，食物强化由VI-2min变为FR1。惩罚（FR）期：约7个训练期后，在声刺激间期中加入电击刺激（0.6~0.85mA），声音信号期间：压杆，获得食物同时给予电击。

2.2 评价指标

压杆率：动物在规定时间压杆的比率。主要的评价指标是非惩罚期和惩罚期的压杆率，前者用来检测药物非特异性效应，如镇静或兴奋效应，后者反映动物焦虑情绪的变化。抗焦虑剂选择性增加惩罚期反应，呈阳性结果，而非抗焦虑剂如抗精神病药、兴奋剂等均呈阴性反应。