噬菌体展示技术：从基本流程到广泛应用

xiaoqin

噬菌体展示技术是一种筛选技术，通过基因工程技术将外源蛋白或多肽的基因序列插入到噬菌体，进行多轮筛选，最终在体外获得具有高特异性和高亲和力的重组抗体。下面为大家介绍噬菌体展示技术基本流程：

一般来说，噬菌体展示技术有以下5个步骤:

步骤1:构建噬菌体展示库

重组DNA技术用于将外来cDNA整合到病毒DNA中。不同的基因组被插入到多个噬菌体的基因组中。剪接到一个外壳蛋白的基因中，使该蛋白显示在噬菌体颗粒的外面，而这些分离的噬菌体只展示一种蛋白、肽或抗体。这些噬菌体的集合即为库，如抗体噬菌体库、蛋白质噬菌体库或随机噬菌体库。

步骤2：结合

这些库暴露于选定的目标，只有一些噬菌体会与目标相互作用。这些目标是计划识别特定的配体，如固定的蛋白、细胞表面蛋白或组织细胞表面蛋白。

步骤3：洗涤

未结合的噬菌体可以被洗涤缓冲液冲走，只留下那些对受体有亲和力的噬菌体。

步骤4：洗脱

洗脱缓冲液洗脱回收对目标有亲和力的噬菌体

步骤5：放大

展示特异性的洗脱噬菌体被用来感染新的宿主细胞进行扩增，或直接进行细菌感染和扩增回收的噬菌体。

噬菌体展示的应用

噬菌体展示技术在基础研究、诊断和治疗应用领域发挥了关键作用。

重组抗体具有高特异性和高亲和力，可用于在侧流分析（LFA）、ELISA和细胞成像等多种诊断平台中快速准确地识别样本中的目标抗原。大多这些平台都利用抗原捕获测定或抗体捕获测定来诊断某些疾病的存在。

阿达木单抗（市场名为Humira®）是首款通过噬菌体展示技术获得上市批准的治疗性抗体，其可中和肿瘤坏死因子，主要用于治疗类风湿性关节炎。噬菌体展示技术的出现，使得抗体药物的研发有了突破性进展，已成为最重要的药物筛选平台之一。

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