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[分享] Western Blot有阳性条带,但条带比较弱的原因

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发表于 2023-8-1 11:40 | 显示全部楼层 |阅读模式

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(1)抗体染色不充分
增加抗体浓度,延长孵育时间。
(2)酶活性降低
直接将酶和底物进行混合,如果不显色则说明酶失活了。选择在有效期内、有活性的酶联物。
(3)标本中靶蛋白含量太低
增加标本上样量。
(4)洗膜过度
缩短洗涤时间。
(5)HRP抑制剂
所用溶液和容器中避免含有叠氮化钠。
(6)抗体活性降低
选择在有效期内的抗体,工作液现配现用,避免长时间放置。
(7)封闭过度
减少封闭剂的量或缩短时间;换用不同封闭剂类型。
(8)曝光时间过短
延长曝光时间。
(9)HRP抑制剂
所用溶液和容器中避免含有叠氮化钠。

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