重组肠激酶在2-8℃条件下14天的稳定性

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重组肠激酶在2-8℃条件下14天的稳定性

试剂:

试剂A: 25 mM Tris HCl Buffer, pH 8.0 at 25°C (称取Tris 0.303gr, 溶解在80ml 纯化水中， 25°C，用2mol/LHCl 调pH 8.0，加纯化水至100ml.)  
试剂 B.  重组肠激酶酶液
2-8°C保温箱保存的三个批次的重组肠激酶：REK161101 (10U/μl),
REK161002(10U/μl), REK160901(10U/μl).
试剂 C.  底物溶液
底物蛋白溶液: 50μg/支, 1mg/ml, 储存在 -80°C.
活性测定：
用试剂A稀释REK 溶液至0.1 unit /μl，取1 μl 至底物溶液中50μl (50μg/支, 1mg/ml).混匀，25 °C酶切14-16h, SDS-PAGE分析酶切结果。
单位定义：1U定义为在25℃，12h~16h之内，将0.5mg保存于25mM Tris-HCl 8.0 缓冲液中的融合蛋白切割95%所需的酶量。
操作步骤：
稳定性研究：将重组肠激酶溶液储存在密封避光2 - 8℃冰箱中，分别在第1,3,5,7和14天时测定酶活性； 取三批次的平均值作为检测结果。
结果：
结果如图1和图2所示：
重组肠激酶溶液在密封避光2 - 8℃冰箱中保存14天后，稳定无活性损失。