IVD产品经理系列-免疫知识细说之组织配型与移植

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组织配型与移植

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造血干细胞移植的HLA配型

节选《造血干细胞移植的HLA配型》

中国医学科学院血液病医院

杨栋林

广义的器官移植：用自身或异体的正常器官、组织或细胞置换病变或功能缺失的器官、组织或细胞，以维持和重建机体的生理功能。影响移植成功的关键因素是可能发生的免疫排斥反应；

HLA ,即人类主要组织相容性复合物(major histocompatibility complex , MHC) ,定位于人类6 号染色体短臂区域6p21. 3 ,包括220 多个基因, 大小4Mb 左右。其中许多基因编码免疫系统蛋白质,包括那些控制T 淋巴细胞和自然杀伤细胞反应的蛋白质。

HLA基因的遗传特点

1.高度多态性；HLA基因呈现多位点复等位的特点；

2.共显性遗传：每对等位基因同时表达；

3.单倍型遗传：位于同一条染色体上的 HLA各位点的基因组合；

4.连锁不平衡：单倍型基因非随机分布的现象；

一.HLA分型技术

1.血清学分型:

补体依赖的细胞毒实验;

待测淋巴细胞与已知抗体孵育，再加入补体，若该抗体与淋巴细胞膜上HLA分子相匹配，则激活补体系统导至待测细胞膜的破坏，否则细胞膜完整不受影响。

局限性：需要活的淋巴细胞；存在交叉反应；隐蔽抗原无法识别；人为影响因素多质控难做；

2.细胞学分型：

混合淋巴细胞培养技术；

受者淋巴细胞与已知类型的淋巴细胞或者供者淋巴细胞混合培养，两种细胞HLA分子表型如果相同则不能刺激淋巴细胞增殖，反之则刺激淋巴细胞增殖，分为单双向两种类型。

局限性：需要活的纯合子表型的淋巴细胞；增殖检测方法要用到同位素；

3.分子生物学技术分型

二．分子生物学技术分型详解

聚合酶链反应（PCR）

在多聚合酶，引物，底物和模板的参与下通过变性，退火，延伸三个循环步骤在短时间内达到对目的片断的大量扩增，是基因分型的基础。

RFLP/PCR-RFLP/PCR-SSP/

PCR-SSCP（单链构象多态性）

PCR-sequencing

PCR-SSO（序列特异性寡核苷酸探针杂交）/基因芯片技术

流式细胞仪技术

氨基酸残基配型标准分型技术

根据HLA分子346个氨基酸残基中对移植物排斥与存活率具有重要影响的关键氨基酸，当供受者的关键氨基酸残基相同，尽管接受HLA抗原部分错配的供体，产生的免疫反应性仍然是低反应性或无免疫反应性，从而使移植物得以长期存活。

三．支持指南

《造血干细胞移植HLA配型指南》

《造血干细胞移植HLA配型指南(续)》

《儿童恶性血液病脐带血移植专家共识》

《美国国家骨髓库成人无关供者造血干细胞移植HLA配型指南》

《我国移植配型实验室现状及规范化管理》

四．物价收费