Ni IDA琼脂糖磁珠（MAg25K-IDA-Ni）材料说明

enriching

Enriching Beads® Ni IDA琼脂糖磁珠是专为组氨酸标签(His-tag)蛋白纯化而设计的新型功能化材料。与传统的金属螯合琼脂糖或者葡聚糖预装柱相比，Ni IDA琼脂糖磁珠具有顺磁性，借助外加磁场易实现目标蛋白的分离与纯化；操作简单，一步纯化即可获得高纯度的组氨酸标签蛋白；可通过洗脱液体积控制目标蛋白浓度，方便后续的样品处理，Ni磁珠可简单再生、重复使用。Ni IDA琼脂糖磁珠适合原核细胞（如大肠杆菌）表达的可溶性组氨酸标签蛋白的纯化。

Enriching Beads®特点是结合载量高；非特异性吸附低。可针对细菌，酵母，昆虫和哺乳动物细胞等分泌或胞内表达的组氨酸标签蛋白。在去离子水，长期保存建议20%乙醇，2℃~8℃，请勿冻融使用。

【备注信息】

1．磁珠与蛋白结合量与目标蛋白特性有关，此处仅作参考值；

2．固形物浓度10% (v/v)是指1mL磁珠悬浮液中包含100μL体积的磁珠；

3．产品可配合英芮诚ETP-32型核酸提取仪实现高通量工作；

4．磁珠使用和保存过程中应避免反复冻融，且不可以干燥；

5．用户可进一步检测经Ni IDA琼脂糖磁珠纯化、磁场分离后的组氨酸标签蛋白上清液，优化蛋白纯化流程；

6．本产品可重复使用8~10次，当纯化性能降低时，建议进行再生处理；

7．使用过的磁珠重复使用时，建议纯化同种蛋白，纯化不同种类蛋白时，建议使用新的磁珠。

【磁珠再生】

   Ni IDA琼脂糖磁珠连续使用8~10次后，结合目标蛋白的能力可能会明显降低，建议进行磁珠再生处理，Ni IDA琼脂糖磁珠的再生需要先自行配置下列缓冲液：

   Stripping Buffer：50mM Tris-HCl、150mM EDTA的PBS溶液，pH=7.2~7.6；

   Beads Wash Buffer：0.5M NaOH，2M NaCl，去离子水溶液；

   Recharge Buffer：100~200mM NiSO4溶液；

   Storage Buffer：20%(v/v)乙醇。

1.将Ni IDA琼脂糖磁珠悬浮液磁性分离去除上清液；

2.加入1mL Stripping Buffer，充分混匀磁珠，室温旋转混合10min，磁性分离去除上清液，重复此步骤1次；

3.加入1mL去离子水，充分混匀磁珠，磁性分离去除上清液；

4.加入1mL Beads Wash Buffer, 充分混匀磁珠，室温旋转混合10min，磁性分离去除上清液，去离子水重复洗涤3~5次，至洗涤液呈中性为止；

5.加入1mL Recharge Buffer，充分混匀磁珠，室温旋转混合30~60 min；磁性分离去除上清液，去离子水重复洗涤5次以上，磁珠再生完毕。

   

注：以上再生的磁珠可直接用于His标签蛋白的纯化，或分散于超纯水中短期保存，长期保存建议分散到20%(v/v)乙醇溶液，置于2~8℃保存。