无需切片活检，直接分析血液中癌细胞基因

长长的路

日本爱科来公司（ARKRAY）2016年10月17日宣布，与东京大学生产技术研究所共同开发出了对血液中极其微量的癌细胞进行基因分析的新技术。据介绍，该技术采用“高纯度浓缩系统”，对转移性癌症的诊断、抗药性癌细胞的变化观察、治疗效果的早期判断等十分有效。详细情况已在“第75届日本癌学会学术总会”（2016年10月6～8日）及“欧洲临床肿瘤学会（ESMO 2016）”（10月7～11日）上发表。

此次的新技术的流程

在血液中循环的癌细胞（circulating tumor cell：CTC）在末梢血中只有极微量存在，是由原发性肿瘤进入血管，在体内循环发生转移。诊断癌症时通常采用提取部分癌组织的活检方式，但这种方式给患者造成的身体负担较大。因此，通过血液检查对CTC进行检测分析，帮助尽早发现癌症和癌症转移的技术备受期待。CTC的基因分析作为近几年备受关注的液体活检（Liquid Biopsy）方法也非常有用，比如确认抗癌药治疗中癌细胞的抗药性等。

另一方面，10mL血液中仅有数个～数十个CTC。因此，这种检测方式技术上的难度很大。另外，在临床现场高灵敏度检测CTC进行基因分析时，面临三大课题，分别是处理后的样本中仍残留大量血细胞、只能回收带特定标记的CTC、整个过程耗时耗力。研究小组此次开发出了能克服这些课题的方法。

检测灵敏度为1个/mL，发现率为100％

此次开发的CTC分析系统由4步组成。（1）过滤全血，对过滤器上捕捉到的细胞进行免疫染色和磁性标记；（2）利用磁分离技术去除、提纯通过过滤器回收的细胞悬浊液中残留的白血球；（3）利用介电泳技术将提纯后的细胞浓缩到微流体浓缩设备内的观察室中，利用荧光显微镜观察；（4）全量回收浓缩到观察室内的细胞，无需提炼核酸，使用基因分析装置，分析基因变异。

利用“浓缩设备”

在验证过程中，研究人员尝试使用添加有培养肿瘤细胞株的全血，检测添加细胞的基因变异（EML4-ALK、EGFR、KRAS或PIK3CA）。结果，成功检测出了添加到8mL全血中的各培养肿瘤细胞株的基因变异。检测灵敏度为1个/mL，这一浓度下发现肿瘤细胞和基因变异的成功率为100％（十次中十次）。

这时残留的白血球数为平均87个。从处理全血开始的9个小时内，获得了基因变异的检测结果以及肿瘤细胞数和残留白血球数的计数结果。

利用此次的技术，无需挑选带特定标记的CTC，就能去除无用的血细胞。因此，这一技术可分析各种类型的CTC基因变异，即便是表型发生变化的CTC，也可有效检测分析。

（记者：大下淳一，《日经数字健康》）