循环肿瘤细胞（CTCs）的数量真的这么少吗？！

检验之星 · 发表于 2016-2-16 11:43

登陆有奖并可浏览互动！

您需要登录才可以下载或查看，没有账号？立即注册

×

据有关文献报道：

Allard等检测了99例肺癌患者（主要是NSCLC）的168个样品，发现肺癌患者外周血中CTCs数目≥2、≥5、≥10和≥50的患者分别占总患者的20%、14%、10%和6%。

Krebs 等检测101 例Ⅲ~Ⅳ期的NSCLC 患者的CTCs，发现Ⅳ期的数目为0 ~ 146，Ⅲb 期为0 ~ 3，而Ⅲa 期则没有CTCs。

一个样本量为430例的多中心前瞻性研究发现 CTCs > 3个/7.5mL的结直肠癌患者较差的治疗反应以及较低的5年生存率，但假若治疗后CTCs水平可下降（< 3个）则疾病转归较好。

………...

癌症患者外周血中的循环肿瘤细胞（CTCs）数量真的这么少吗？根据我们专业的CTC检测，通过使用我公司CytoSorter循环稀有细胞分选系统，针对非小细胞肺癌、乳腺癌、宫颈癌、结直肠癌和甲状腺癌等多种肿瘤的各阶段CTC进行分离富集和鉴定，我们富集到的CTCs数量比文献报到的数量多。

那为什么文献报道中的检测CTC数量这么少，我们仔细研究发现，事实竟是如此：

(1) 确实很少：健康人或治疗康复的患者CTCs数量非常少（个位数，甚至没有）

理论上来说，健康人或者治疗康复的患者血液循环中是不含有CTCs的，但也不排除某个良性肠炎症患者血液中出现几个CTCs。一般患者10mL血液中CTC含量也只有1-10个。

(2) 数值小，而不是数量少：预后、疗效等的临界值（阴阳性判读标准）CTCs数值非常小（个位数）

目前主要是以CTCs数量临界值为依据，判断患者的无进展生存期和总生存期，然后评估预后和疗效。因为健康人和治疗康复患者血液循环中CTCs数量应该是0，所以这个临界值自然很少，一般都是个位数，比如胃癌CTCs ≥1个即为阳性，晚期乳腺癌CTCs≥5，即判为无进展生存期和总生存期较差，预后较差。

(3) 所采用的CTCs检测方法学存在缺陷：

所采用的CTCs分离、富集和检测方法学存在缺陷，限制其对CTCs的捕获能力

表1 CTCs各种富集方法的优缺点

分离方法	优势	缺点
密度梯度离心法	1. 可以与其它的富集方法结合使用来提高富集效率，比如免疫磁珠法； 2. 操作简捷。	1. 灵敏度低； 2. 血液样本量大； 3. 肿瘤栓子损失； 4. 价格昂贵； 5. 重复性差。
依据细胞大小	1. 可以处理各种样本 (比如体液，血液等)； 2. 可以富集各种CTCs； 3. 可以检测肿瘤栓子； 4. 灵敏度较高。	1. 只能富集体积较大的细胞，容易导至假阳性； 2. 不能检测体积较小的肿瘤细胞。
免疫磁珠法	1. 重复性好； 2. 高灵敏度和特异性； 3. 定量分析CTCs。	1. 容易丢失那些不表达特异性分子标记的CTCs； 2. 单克隆抗体价格昂贵。
CTCs-芯片法	1. 高纯度，高效率； 2. 可以进行细胞病理学染色，ICC等； 3. 高通量。	1. 容易丢失那些不表达特异性分子标记的CTCs； 2. 制造工艺复杂，价格昂贵。
纳米材料法	1. 高比表面积有利于提高工作效率； 2. 可以与其他方法结合使用来提高灵敏度。	1. 需要特殊材料和加工程序； 2. 价格昂贵。

目前大多数CTCs分离富集技术是两种或两种以上CTCs分离富集技术的结合，这样叠加就加大了外周血中CTCs丢失的程度。CTC分离富集方法学的固有缺陷，导至不能完全捕获CTCs，最后的结果是让一部分CTCs成为漏网之鱼、逃之夭夭。CytoSorter循环稀有细胞分选系统巧妙结合纳米技术和微流控技术，采用级联放大优质的高灵敏捕获抗体，结成天罗地网，高效捕获外周血中的CTCs。

CTCs上的检测靶标表达丰度较低、难以检测

Cho等运用免疫荧光法比较多种肿瘤患者血液中CTCs 的水平，发现只有50%的非小细胞肺癌患者CTCs 为阳性，可见检测肺癌CTCs仍有一定难度。这可能是由于肺癌患者CTCs中某些基因表达的差异，导至一部分CTCs表达丰度比较低、难以检测到。这可能是由于那个时代检测方法学和捕获抗体的质量的限制。华得森生物的CytoSorter循环上皮细胞检测试剂盒，采用不断改良的优质的高灵敏捕获抗体，高效捕获靶标表达丰度较低的CTCs，使CTCs得捕获更加全面，数量更接近真实。