临床检验的杀猪刀——血液&时间

检验医师

血液离体后在自然环境中很快就会凝固，离体血液会激活外源性凝血因子，它能使纤维蛋白原变为纤维蛋白从而导至血液凝固（内源性凝血就是血管内皮细胞受伤后破损释放出一些因子引起凝血）。血液离体后正常凝固析出的是血清，里面没有纤维蛋白原，而抗凝的血液放置一段时间或者经离心后得到的上清液是血浆，血浆里含有纤维蛋白原！

生化活性测定的影响

        血样放置过久会导至某些生化成分改变，如白细胞降解作用、红细胞逐渐死亡；红细胞中的钾离子进入血清使血清钾升高；CO2逸散使其结果降低；血液pH值变化；酶活性降低或丧失等。

血糖测定的影响

        红细胞消耗能量及细菌污染而分解葡萄糖使血糖浓度降低。GLU（血糖）在血样放置2~3小时后可降低6.7%~15%，故监测最好在2~3h内完成，6h即超出实验室可接受范围；BUN（尿素氮）、TBIL（总胆红素）、电解质的检测最好在采集后4~6h内完成检测；C02-CP（二氧化碳结合力）、K在6～24 h内逐渐升高；ALT(血清谷丙转氨酶)在6h后逐渐下降。

血小板计数的影响

        血小板计数增高的原因可能有：①随着标本放置时间越长，细胞破坏越多，分析仪误将破碎的红细胞碎片计数为血小板；②由于血细胞在体外也会进行新陈代谢，使血浆渗透压和pH值发生了改变；③同时还与溶血剂的种类、稀释液的渗透压、离子强度、仪器等因素有关。因此所有标本应在60min内测定血小板，超过60min不能发报告。

hs-CRP测定的影响

        将近70%的静脉抗凝血样品和末梢血样品在放置4℃、24h后hs-CRP测定值开始下降；随放置时间的增加hs-CRP测定值也在不断的下降，与即刻测定值比较偏移最大可达44%。但也有部分样品放置24h或7d后测得的hs-CRP值高于即刻测定值，最高的1例静脉抗凝血样品存放7d后增高81%。

cTnI测定的影响

        标本因置放时间延长，cTnl的浓度水平衰减梯度不呈正态分布，这可能与cTnl半衰期有关。肌钙蛋白在循环血中的半衰期大约为数小时，由肾脏排出体外，而游离cTnI在循环血中的半衰期大约为67min，与cTnI在血液存在形式有关。cTnI测定应在20min内完成，40min和60min分别测试其水平就会有所下降。对于NT-proBNP，在样本放置24h内检测结果无变化，72h的检测结果无明显变化。

D-二聚体测定的影响

        血液离体后血浆中凝血因子被活化且有纤溶酶被激活，从而导至交联纤维蛋白的形成并随之发生降解，会有D-二聚体的产生，所以随着血样放置时间的延长，D-二聚体的测量值也会不同程度的升高，在-20℃条件下保存的样本，7天之内测定D-二聚体结果均无变化；故对于检测D-二聚体的样本最好在4小时内完成，如不能及时出报告,应将血浆放置4℃冰箱保存但不宜超过24小时，24小时之内不能检测的标本须放在-20℃冷冻保存,这样才能保证检测结果的准确性。

PCT测定的影响

        对于体外样本，采用不同的采血管、不同放置时间都会对PCT造成影响。样本放置12h时EDTA-K2管平均降解了(2.61±0.56)％，比较其他采血管，其降解速率最慢。分离胶管平均每小时降解0.46％，降解最快。在放置24h时，普通干燥管、分离胶管、肝素锂管、EDTA-K2管分别平均降解了(9.66±1.60)％、(11.01±1.62)％、(8.00±0.91)％、(3.86±0.76)％。放置72h时，分离胶管平均降解率达到(41.25±1.68)％，仍为降解最快，而EDTA-K2管则仅平均降解(15.77±1.65)％。EDTA-K2抗凝标本即使存放于4℃，在7d时与分离血浆即刻测定值差异无统计学意义；存放于-70℃，样本放置7d叠加反复冻融2次对测定结果无明显影响。

总结:

        血样放置过久会导至某些生化成分改变及其标志物测定结果的改变，而现代发达科技能使血液样本的存放时间大大延长，但并不意味着存放时间长久对检测结果较好。一般说来未加促凝剂的血液离体后30min即可进行血清分离操作，加有促凝剂的血10min就能进行离心，抗凝血在抽血后可立即分离血浆。如果不能及时检验，则应按检测要求进行标本预处理。例如：血清分离后置2-4℃冰箱保存、制成去蛋白滤液、添加防腐剂等。需要注意血清冷藏前应移吸入另外的加塞试管，勿与血细胞共存，否则可引起溶血及其它误差因素。用于酶学检测的血清不宜反复冻融，此外还应注意保存时间不能太长，故实验室对血样的处理应根据其具体检验项目做出相应的明确规定。