【盘点】商业化循环肿瘤细胞分离检测技术

检验之星

循环肿瘤细胞（CirculatingTumor Cells，CTCs）是指来源于原发肿瘤或转移肿瘤，获得脱离基底膜的能力并进入血液循环系统的肿瘤细胞，包括存在于外周血中的各类肿瘤细胞。研究表明CTCs的生成是肿瘤发生转移的必要前提，CTCs检测有助于研究肿瘤转移机制、肿瘤早期筛查、指导肿瘤治疗、判断治疗效果、为推断预后提供可靠参考，因此CTCs检测成为国内外肿瘤治疗关注的焦点。然而CTCs在血液中浓度极低，约为1个CTC/109个血细胞，所以进行CTCs检测的关键在于能否在复杂环境中高效、迅速准确地富集和检测CTCs。

为了提高CTCs检测的灵敏度，在检测前通常需要采用各种技术对血液样本中的CTCs进行富集和纯化，富集技术主要包括以下几类：（1）基于过滤器的方法：基于细胞大小进行肿瘤细胞富集，例如Rarecells的ISET技术就是依据肿瘤上皮细胞的大小使用孔径约8微米滤膜进行CTCs的富集；（2）微流体装置：基于细胞的大小、细胞表面标志物的荧光或者磁性标记、电泳率、细胞黏附等细胞特性进行肿瘤细胞富集；（3）光纤阵列扫描方法：基于肿瘤细胞的形态和介电性能将肿瘤细胞与其它血液细胞进行区分；（4）抗体捕获方法：基于肿瘤细胞特异表达的表面标志物进行肿瘤细胞富集，如CellSerch使用EpCAM抗体包被的铁磁珠进行免疫分离。在进行CTCs富集纯化后，再使用相应检测技术对其进行检测鉴定，目前已商业化的CTCs分离检测技术如下表所列：

Biocept

2014年上市的Biocept主要从事于肺癌、结直肠癌、胃癌、乳腺癌和黑色素瘤的诊断与指导治疗。Biocept的CTCs分离检测技术包括基于抗体的富集方法和对肿瘤细胞DNA进行纯化，富集得到的CTCs可用于肿瘤细胞分子描述和评估蛋白表达的变化，而纯化得到的肿瘤细胞DNA则利用高通量测序平台进行分析检测。CTCs检测分析可以对患者的癌症做全面、实时、精准的评估，为医生的治疗提供指导性意见。

Cynveniu

Cynvenio是一家成立于2008年的癌症诊断公司，专注于通过血液中癌症生物标记物的分子分析来改变癌症治疗和管理模式。ClearID平台技术来源于加州大学，通过基于CK+/CD45-分选的微流体装置进行CTCs的分离，进一步使用高通量测序平台进行检测，能够分析血液样本中的CTCs和游离DNA，可以检测出CTCs含量并检测到相关基因突变，为癌症治疗提供指导性意见。

FluxionBiosciences

Fluxion公司创立于2005年，总部位于美国加利福尼亚州。它主要生产细胞功能分析所用的分析仪器，包括BioFlux系统，模拟剪切力活细胞观察工作站；IonFlux系统，自动化的膜片钳；以及IsoFlux系统，循环肿瘤细胞分析工具。IsoFlux系统利用一种专利的微流体技术以及免疫磁珠，从生物学样品中分离稀有细胞。它主要应用在循环肿瘤细胞、癌症干细胞、干细胞和免疫细胞的分析，富集得到的细胞可用于下游分析。

ApoCell

ApoCell公司的ApoStream®技术利用肿瘤细胞与外周血单个核细胞之间的介电性能差异，通过一个双向电泳微流装置进行CTCs的富集，富集得到的CTCs可用于下游分析检测。

ClearbridgeBiomedics

Clearbridge Biomedics公司的ClearCell®FX System是第一个能够在1个小时内从少量血液样本中完成CTCs的富集和检测的全自动系统。由于其能够从细胞悬液中富集高纯度的CTCs，从而更有利于下游分子诊断和化验分析，研究人员和临床医生可以使用这些信息来提供及时、量身定做的治疗方案。

CellSearch

CellSearch系统是全球第一个也是目前唯一经FDA批准用于恶性肿瘤疾病管理的检测循环肿瘤细胞（CTC）的商业化产品，该检测系统利用包被了抗EpCAM的免疫纳米磁颗粒富集上皮来源的细胞，随后使用结合荧光染料的CD45抗体和细胞角蛋白（CK）8，18/19抗体与细胞核DAPI荧光染色试剂共同识别CTCs进行检测。

Creatv Microtech

Creatv Microtech 公司的CellSieveTM微型过滤器可以进行CTCs的高效富集，过滤器采用生物相容的聚合物制作而成，过滤器大小为13mm，包含有160000个孔径尺寸为7μm的滤孔。，

Rarecells

Rarecell的ISET设备是依据肿瘤上皮细胞的大小使用孔径约8微米滤膜进行CTCs的富集，可用于处理人、大鼠和小鼠的血液样本。该设备通过了欧盟CE认证，可用于从血液中提取肿瘤细胞。

参考文献：

1．Dickey DD, Giangrande PH. Oligonucleotide aptamers: Anext-generation technology for the capture and detection of circulating tumorcells. Methods. 2015 Nov 26. : S1046-2023 (15) 30160-2.

2. Chen XX, Bai F. Single-cell analyses ofcirculating tumor cells. Cancer Biol Med. 2015 Sep;12(3):184-92.

来源：Cellular Medicine