原位杂交技术+免疫荧光是循环肿瘤细胞检测的理想技术

检验之星

近日，西班牙的研究人员在 Science Reports上介绍了一种CTC检测方法，能利用原位杂交检测小的非编码RNA。研究人员发现在CK表达较少的CTC中，miRNA-21依然表达。研究显示因不受EMT表型的影响，原位杂交技术可以作为CTC鉴别更理想的技术。

研究背景

CTC是从原发性肿瘤脱落，然后进入循环系统的一种细胞。它们到达其他的组织或器官，导至肿瘤转移。鉴于近年来CTC检测技术的进步，研究人员能够利用这些CTC来监测癌症进展，并跟踪监测患者的治疗疗效。

目前，基于上皮标志物分离和鉴别全血中的循环肿瘤细胞的技术，通常是利用上皮细胞粘附分子(EpCAM)和细胞角蛋白(CK)。然而，这些上皮细胞也可能来自其他上皮组织，而并非肿瘤。并且受上皮-间质转化（EMT）的影响，部分CTC的EpCAM或CK表达减少甚至不表达。EMT机制与肿瘤转移相关，其中上皮细胞呈现出间质特征，促进迁移、入侵和抗凋亡。

原位杂交在CTC检测中的应用

研究人员将原位杂交方法以及免疫磁性选择和免疫细胞化学相结合，利用探针来检测CTC。

研究人员选择了靶定多个肿瘤抑制基因的miRNA-21，miRNA-21在癌细胞中表达而不在造血细胞中表达，因此是检测CTC的理想标志物。

研究人员对25例患者的外周血标本进行CTC分析。发现11个标本含有表达CK和miRNA-21的CTC。对于EMT诱导的CK表达丢失的上皮肿瘤细胞系(MCF-7)，原位杂交技术也成功检测到miRNA-21的表达，表明miRNA-21是检测EMT表型的CTC的一个很好的标志物。

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来源：莱尔生物