类风湿关节炎相关抗体检测及意义

检验医师

      一、类风湿因子（Rheumatoid Factor, RF）　　　　　

　　RF是抗人或动物IgG分子的FC片段的抗体。作为一种抗体，其抗免疫球蛋白类型可分为IgG-RF、IgM-RF和IgA-RF等。RF不仅与变性的IgG分子反应，也可同自身IgG或异体IgG分子反应，并且与其他抗原如核蛋白发生交叉反应。在类风湿关节炎患者的血清和滑液中可测出19sIgM-RF、7sIgM-RF和7sIgG-RF，这三种RF可相互发生反应，后二者主要参与关节外症状的免疫复合物。


　　RF产生于外周淋巴结、关节滑膜、扁桃体淋巴滤泡和骨髓等。B淋巴细胞的激活，尤其CD5+B淋巴细胞是产生IgM-RF主要细胞。


　　测定RF的方法常有乳胶凝集法及绵羊红细胞凝集法（SCAT），这两种方法的检测符合率在90%以上，SCAT法的敏感性不如乳胶凝集法，但特异性较高。乳胶凝集法和SCAT法均只能测出19sIgM-RF。IgG-RF、IgA-RF和7sIgM-RF则需用ELISA法测定。RF在类风湿关节炎中阳性率为80%左右，是诊断RA的重要血清学标准之一，但不是唯一的标准，因5%的正常老年人RF可阳性，随年龄的增高，阳性率可增高，年龄超过75岁的老年人，RF假阳性率为2-25%不等。且在许多其他疾病中出现，如自身免疫性疾病：干燥综合征、SLE、PSS、PM/DM等；感染性疾病：细菌性心内膜炎、结核、麻风、传染性肝炎、血吸虫病等；非感染性疾病：弥漫性肺间质纤维化、肝硬化、慢活肝、结节病、巨球蛋白血症等。


　　持续高滴度的RF，常提示RA的疾病活动，且骨侵蚀发生率高。有学者指出，健康成年人高滴度IgM-RF是发生RA的危险因子。


　　临床上RF常作为区分血清阴性脊柱关节病的标准。必须明确，部分RA患者测不出IgM-RF，应进一步检测IgG-RF和IgA-RF，这两种类型RF对IgG分子特异性强，而不易与其他非相关抗原反应。RF滴度越高，对RA的诊断特异性越高。对RF阴性，且临床上高度疑似RA的患者，还可进行免疫复合物中RF的测定，即可将循环免疫复合物经酸化高浓度氯化钠，或高度稀释分离后测RF，这称为隐性RF，尤其在幼年型类风湿关节炎（JRA）患者中阳性率较高。

      

二、抗核周因子

　　　　　

　　抗核周因子（antiperinuclear  factor，APF）是1964年荷兰学者Nienlucis和Mandema用夹粘膜细胞作为底物检测抗核抗体（ANA）时，偶然发现细胞核周围有均质型的4~7?m荧光颗粒，称之为抗核周因子（APF）。进一步研究发现APF主要出现在RA患者血清中，而少见于SLE等非RA的风湿性疾病患者及正常人。APF是一种RA特异性的免疫球蛋白，且以IgG型为主。APF对RA诊断的特异性高达90%以上。是早期诊断RA的有效指标之一。检测APF主要采用间接免疫荧光法（IIF）。

      

三、抗角蛋白抗体

　　　

　　抗角蛋白抗体（antikeratin  antibody，AKA）是1979年Young等人发现RA血清中有一种与大鼠食管角质层成分起反应的抗体，且发现该抗体对RA诊断有较高特异性。AKA的检测方法目前主要采用间接免疫荧光法。研究发现，AKA对于诊断RA的特异性很高（90%左右），初步证实AKA与RA关节压痛数、晨僵时间和CRP有关。AKA与RF、抗RA33/RA36抗体、抗Sa抗体等无交叉反应及相关性，因此，该抗体的检测可以对RF阴性或抗RA33/RA36抗体阴性、抗Sa抗体阴性的患者提供另一个诊断指标。临床研究还表明，AKA与疾病严重程度和活动性相关，在RA早期甚至临床症状出现之前即可出现，因此，它是RA早期诊断和判断预后的指标之一。该抗体在患者滑液中阳性率与血清基本一致，但程度明显高于后者，提示AKA可能在滑液局部合成并对滑膜炎的形成起重要作用。

      

四、抗Sa抗体

　　　

　　抗Sa抗体是以患者Savoic名字命名的一种新型自身抗体。Sa抗原最早在人脾中发现，后又发现Sa抗原存在于人的胎盘及类风湿滑膜翳中，推断Sa抗原可能存在于正常人体组织中，是人体的正常组成成分。抗Sa抗体的产生机制尚不清楚。Despres等人首先报道了该抗体对RA具有诊断特异性，在未经选择的RA患者中抗Sa抗体的阳性率为42.7%，其特异性高达98.9%。抗Sa抗体阳性组患者晨僵、关节受累明显重于阴性组，且血沉增快，X线分期中Ⅱ、Ⅲ期比例亦明显高于阴性组，提示抗Sa抗体阳性者病程发展可能较阴性者快，症状较重，因此抗Sa抗体对疾病的分型可能有一定意义。研究发现，抗Sa抗体在关节滑液中存在，提示在滑膜可能发生原位免疫反应，抗Sa抗体在RA慢性损伤过程中起着潜在的作用。尤其对不典型的早期RA，抗Sa抗体可成为诊断RA的另一个指标。抗Sa抗体不与RF、抗核周因子（APF）、抗ENA抗体和抗RA33抗体等发生交叉反应。RF阳性和阴性的RA患者抗Sa抗体均可阳性，在RA的头几个月就可测出抗Sa抗体，且抗体滴度随疾病活动度和治疗而波动，提示抗Sa抗体的测定对RA的早期诊断、病情监测及指导治疗有所帮助。

      

五、抗RA33抗体

　　　

　　1989年Hassfeld等首次报道抗RA33抗体，因该抗体是诊断RA较为特异的抗体，且与分子量33KD的核酸蛋白发生反应，因此定名为抗RA33抗体。其靶抗原为33KD的核酸结合蛋白，与hnRNP中的A2蛋白一致，抗原来源于HeLa细胞或Ehrilich细胞。检测方法为免疫印迹法（IBT）。1992年Hassfeld在检测抗RA33抗体的同时，发现部分RA患者同时存在针对36KD核酸蛋白的抗体，且后者与抗原分子量同为36KD的抗增殖细胞核抗原抗体（抗PCNA抗体）无关。抗RA33抗体与抗RA36抗体常同时出现，在免疫印迹检测时如同时在33KD、36KD处形成两条特征性条带，对RA诊断更具有特异性。在各项RA早期诊断指标中，抗RA33抗体特异性最高，在RA中的阳性率为35.8%，尤其在RA早期出现。抗RA33抗体的消长与病情及用药无关。

      

六、抗RANA（Rheumatoid Arthritis Nuclear Antigen）抗体

　　　

　　即抗增殖细胞核抗原抗体。因与RA关系密切，故取名为RA相关的核抗体。虽然该抗体主要存在于RA病人中，但并非RA的特异抗体。间接免疫荧光法测得其阳性率：RA40%，非RA结缔组织病20%，正常人5%。抗RANA抗体效价在RA病人中明显高于其他病人。因为RANA存在于EB病毒感染的B淋巴细胞样的细胞株内，故有人提出该抗体出现可能同EB病毒感染有关。

      

七、抗环瓜氨酸肽（Cyclic citrullinated peptide CCP）抗体

　　　

　　抗CCP抗体对RA的诊断敏感性为46.6%，特异性为96.6%。与APF、AKA相关，CCP是filaggrin的一段肽链，但不完全重叠。抗CCP抗体与HLA-DR4相关，提示抗CCP抗体阳性RA病情重、骨破坏明显。抗CCP抗体可用ELISA法检测。


来源：幸福检验