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发表于 2015-1-4 09:27
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我先分享一些最常见的PCR添加剂:
1、DMSO 降低双链的结合力量,减少非特异的产生, 常见浓度 2.5-10%
2、甘油 提高变性效率,稳定溶液中聚合酶的活性 常见浓度 5%-15%
3、TMAC 增强引物和模版之间结合 常见浓度 10-100umol/L
4、甲酰胺 提高变性效率 常见浓度 5%-10%
5、NP40/吐温20 阻止离子去垢剂对聚合酶的抑制效率 常见浓度 0.1%-2.5%
6、7-deaza dGTP 减弱G-C之间的相互作用 常见浓度 75%
7、大肠杆菌单链结合蛋白 增强ssDNA的稳定性 常见浓度 5ug/ml
8、明胶 常见浓度 0.1g/L
9、牛血清蛋白 常见浓度 0.15mg/ml
10、甜菜碱 常见浓度
11、Triton X-100 常见浓度 0.1-0.5%
也不要迷信PCR添加剂,要根据具体实验具体优化。 |
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