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[讨论] PCR增强剂和稳定剂

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发表于 2014-12-31 09:35 | 显示全部楼层 |阅读模式
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 楼主| 发表于 2015-1-4 09:27 | 显示全部楼层
我先分享一些最常见的PCR添加剂:
1、DMSO   降低双链的结合力量,减少非特异的产生,   常见浓度  2.5-10%
2、甘油     提高变性效率,稳定溶液中聚合酶的活性      常见浓度  5%-15%
3、TMAC   增强引物和模版之间结合                           常见浓度  10-100umol/L
4、甲酰胺  提高变性效率                                          常见浓度  5%-10%
5、NP40/吐温20  阻止离子去垢剂对聚合酶的抑制效率   常见浓度  0.1%-2.5%
6、7-deaza dGTP  减弱G-C之间的相互作用                  常见浓度  75%
7、大肠杆菌单链结合蛋白     增强ssDNA的稳定性         常见浓度  5ug/ml
8、明胶                                                                 常见浓度  0.1g/L
9、牛血清蛋白                                                        常见浓度  0.15mg/ml
10、甜菜碱                                                            常见浓度
11、Triton X-100                                                    常见浓度 0.1-0.5%
也不要迷信PCR添加剂,要根据具体实验具体优化。
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 楼主| 发表于 2015-1-21 10:39 | 显示全部楼层
我知道这里面牵涉到公司研发机密,大家不愿分享,期待私下交流。QQ:279490110
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