3,3’-二氨基联苯胺(3,3’-diaminobenzidine,DAB)为免疫组织化学标记最常用的显色剂,其反应产物是一种可以致癌的诱变剂。有些实验室曾经将DAB先加入漂白粉过夜再做废物处理。尽管这种程序完全破坏了DAB,但终反应混合物仍具有诱变作用,且加入了漂白剂后其中含有氯,最后DAB废物以每加仑500元人民币的价格被焚化。若DAB完全被破坏而又不留下诱变副产物的话,DAB废物就可以没有成本/代价的通过排水处理[1,2]。Duke大学环境安全部颁布了两种处理程序可以完全破坏DAB,而不会留下终反应混合物。现介绍如下: 1.高锰酸钾(KMnO4)法:DAB在18ml0.1mol/L的盐酸溶液中或在缓冲液、水中,与5ml 2mol/L H2SO4和5ml 0.2mol/L高锰酸钾(KMnO4)水溶液混合,然后混合液在室温放置过夜,用抗坏血酸钠脱色/漂白,再加碳酸氢钠(NaHCO3)中和。该法优点是H2SO4和KMnO4已经存在于废液中,可以用来处理DAB,其最终产物可以安全地直接倾倒在排水系统。 2.过氧化氢(H2O2)/辣根过氧化物酶(HRP)法:DAB在缓冲液中被稀释到浓度为100mg/L,用1mol/L.盐酸将pH调到5-7之间。取20ml一份,与6单位的HRP和60ml 3%的H2O2混合。这种混合物可以放置3h,经过滤再与5ml 5%抗坏血酸溶液混合。如果这么处理的话,我们需要购买HRP。此法与焚化法相比,要经济的多。 以上两种方法相比较,KMnO4法最适合于降解量大的或浓度相对较高的DAB溶液,而H2O2/HRP法最适于处理相对稀释的DAB溶液。由于它们相对简单,任何一种处理方法都可以在每一个实验室使用。为了保护环境,每个使用DAB的实验室,一定经减毒处理后再将其废物倾倒。
参考文献 1.Lunn G, Sansone EB, Safe disposal of diaminobenzidine. Trends Genet,1992,8:7 2.Hom H, Safe diaminobenzidine (DAB) dispoal. Biotech Histochem, 2003,78:229 (转自 病理世界)
|