Anti-CCP类风湿性关节炎的早期特异性检测

检验医师

一、类风湿性关节炎的概述

类风湿性关节炎（Rheumatoid Arthritis，RA)是一种高致残性自身免疫性疾病，以慢性、对称性、多滑膜关节炎和关节外病变为主要表现，早期有关节红肿热痛和功能障碍，晚期关节可出现不同程度的僵硬畸形，并伴有骨和骨骼肌的萎缩，极易致残。一般在发病约2年左右即可能出现不可逆的骨关节损害，早期诊断、早期治疗是防止关节畸形和致残的关键，如最近的网络红人，被称为“史上最牛乞丐”的夏海波在读高二时被确诊患上类风湿性关节炎，本来非常有望进入大学深造，因病情加重，他只好辍学治病。若能早发现早诊断早治疗，也许他能够有另一种美丽的人生。


目前最常用的血清学指标是类风湿因子(Rheumatoid Factor，RF)的检测。RF检测的方法简单、敏感性高，但特异性相对较差。以其高敏感性被列为1987年美国风湿协会（ACR）诊断RA的唯一血清学指标，RF虽敏感性较高，但特异性较低，很多非RA的自身免疫性疾病如系统性红斑狼疮、原发性干燥症、骨关节炎等疾病也会出现RF阳性，某些正常老年人中也有大约5%的阳性率，所以，RF在RA的早期诊断中存在一定的局限性。


近年陆续报道APF、AKA、AFA对RA诊断有一定特异性。但该类抗原物质(人颊黏膜上皮细胞和大鼠食道中下段角质层)的获得和保存尚有技术困难，检测手段用间接免疫荧光法(IIF)不易标准化，结果判断存在主观性，难于推广应用。上个世纪九十年代发现APF、AKA的靶抗原为上皮细胞分化终末阶段的细胞骨架成分Filaggrin，用免疫印记法(Western Blot，WB)及ELISA法可检测到RA血清中针对Filaggrin的抗体AFA，在检测方法学上有一定进步。由于Filaggrin是从人类表皮细胞提取的，其氨基酸的序列及形态存在异质性，不可能成为标准的抗原底物。1998年Schellekens首次利用亲和层析方法人工合成了抗核周因子抗体（APF）、抗角蛋白抗体(AKA)和抗聚角蛋白微粒蛋白抗体(AFA)的共同抗原决定抗环瓜氨酸肽(CCP)。Anti-CCP独立于RF，对RA具有较高的特异性，误诊率明显低于RF，阳性预测值、阳性似然比及Youden指数明显高于RF。2000年，Schellekens等首次用ELISA法检测RA中CCP抗体，敏感性和特异性为68%、98%；本次实验用上海荣盛抗环瓜氨酸肽(Anti-CCP)抗体检测试剂盒(ELISA)检测，其敏感性和特异性均高于前者，特别是敏感性，敏感性和特异性分别达到80.33%、96.14%。进一步证实RA血清中确实存在特异性识别CCP的抗体。(见表一)

通过分析CCP抗体与RF、APF、AKA、AFA在RA中的分布，显示5种检验指标及检测方法的结果阳性率之间，CCP抗体与AKA差异非常显著，与RF差异不显著；CCP抗体与AKA、RF之间对RA的诊断具有相关性；CCP抗体与AKA不完全重叠，与以往报道不完全相同，可能与AKA、RF检测的方法学不同有关，也可能存在其他尚需探讨的原因。从表一结果可见CCP抗体对RA的诊断试验值均优于AKA、RF，故在临床诊断中具有良好的应用价值。


二、上海荣盛抗环瓜氨酸肽(Anti-CCP)抗体检测试剂盒(ELISA)的特点


1、高敏感性和高特异性：第三代Anti-CCP，同时包被3个相互补充的环瓜氨酸肽，较第二代产品具有更高的特异性、敏感性。临床实验室验证，敏感性80.33%，特异性96.14%（数据来源参见表二）。


2、更好的精密度：通过对上海荣盛抗环瓜氨酸肽(Anti-CCP)抗体检测试剂盒(ELISA)不同浓度血清的批内和批间精密度测试，结果显示其精密度CV值均小于10%。


3、时效性：常规ELISA方法，定性和定量检测CCP抗体；操作简便、快捷，2小时内可读诊断结果。


4、**性预测值：Anti-CCP抗体在RA的很早阶段就可出现阳性，具有很高的阳性预测值，可达到98.21%。最早提前10年预测类风湿性关节炎的发生，平均提前预测的时间为5.3年。


5、对RA的预后价值：可以预测10年放射学上关节损害进展，Anti-CCP抗体阳性的RA患者骨破坏较阴性患者严重，是侵蚀性关节损害的一个重要标志及危险因素。


6、良好的重复性、稳定性。


7、人性化的包装设计：获得专利的翻盖式包装盒及一次性试剂架设计，在操作过程中，试剂不易倾倒或损坏，试剂摆放一目了然（专利号：200920068089.X）。


三、上海荣盛抗环瓜氨酸肽(Anti-CCP)抗体检测试剂盒(ELISA)的临床实验室验证的数据结果

四、小结

抗CCP抗体可用于RA的临床检测，对其早期诊断、鉴别诊断及疾病预后有重要价值；ELISA检测方法简便，所得结果可靠，非常适用于临床推广应用并具有广泛的研究前景。

来源：检验世界网