流式细胞技术在医学检验中的应用研究进展

虎威将军

流式细胞术是一项结合多门学科的综合技术， 包括激光技术、 计算机技术、 物理学技术、细胞生物学及免疫学技术等。FC M让细胞处于快速流动中，然后对流动中的细胞或生物粒子进行分选和分析。F C M经过多年的发展已经逐渐成熟，并且可以运用到多个领域中，包括肿瘤学、 细胞生物学、 生物化学、 细胞遗传学、 免疫学、 临床医学、 基础医学以及临床检验等各个领域 。 F C M在进行医学检验方面应用广泛， 包括肿瘤、 血液学、 免疫学等许多疾病的检验， 具有检测样品快速、 准确以及敏感性高等特点， 可从一个细胞中测得多个参数， 为医学检验提供了一种强有力的手段和全新的医学视角， 是医学检验 中重要的一种研究工具。

1  F C M的工作原理 流式细胞仪主要由以下五个部分构成： ①液体流动系统； ②激光及光学系统；③光学系统； ④信号处理与分析系统； ⑤细胞分类筛选系统。其基本原理可以概述为通过激光测量鞘流中染色细胞标志物的荧光强度和宽度、前向和侧向散射光强度及宽度等参数。由于荧光标记所使用的单克隆抗体种类不同，可以通过定量检测出细胞上的不同抗原物质来区分细胞，也可以用来分析细胞成分  。 F C M的基本原理是把待测样先制成单个细胞的悬浮液， 然后用特异性荧光染料将此悬液进行染色， 染色后的样品放入样品管， 通过气体的压力使样品进入鞘液； 鞘液与样品之间会形成一定压力， 当这压力达到一定程度后， 在鞘液的带动下， 单细胞悬浮液样品会形成单细胞柱状经过激光聚焦区， 样品柱与激光束垂直， 由于样品经特异性染料处理， 因此经激光激发下会 产 生 特定 波 长的荧光。  流式细胞仪中的光学系统收集到荧光信号后进行信号处理， 再经过计算机系统对处理的信号进行存储、 显示， 然后做出统计分析从 而获得所需 要的检测

结果[  。

2  F C M 在肿瘤学中的应用由于人体中正常细胞大部分都是以二倍体存在， 正常细胞在发生癌变时 DN A数量会发生变化。 F C M可以检测细胞中 D N A的含量变化从而运用于肿瘤的检测，在病理形态学诊断上一直把 F C M技术视为肿瘤诊断的一个“金标准” 。但由于癌症早期缺乏客观明确的诊断指标， 给治疗工作带来很大困扰，F C M的出现使肿瘤治疗有了质的飞跃。其应用主要是通过测定 D N A含量实现的，包括癌前病变检查、早期癌变的检出、化疗指导以及预后评估等。F C M检测标本包括实体瘤标本或穿刺标本、胸 腹腔液体、 膀胱冲洗液、 尿液、 食管镜及支气管镜钳取的少量活检组织等。DN A非整倍体的出现是癌变的一个重要标志。因此，临床上可利用流式细胞仪.